酶定向进化技术研究进展-杭州师范大学学报.PDFVIP

第 卷第 期 杭州师范大学学报自然科学版 年 月 酶定向进化技术研究进展 李珍华章志量方秀娟李燕琼石陆娥 杭州师范大学生命与环境科学学院浙江 杭州 摘 要酶定向进化是模拟自然进化过程用于改造酶性质的一种新策略 在以易错 为代表的无性进 化技术基础之上有性进化技术的发展使酶定向进化更接近于自然进化过程 与此同时为解决巨大容量的突变 文库与有限的筛选技术之间的矛盾许多新的高通量筛选方法不断涌现大大加快了酶定向进化技术的发展 文 章从构建高质量的突变基因文库和选择有效的高通量筛选方法两方面详细总结了近几年出现的新技术并对其 应用情况进行介绍 关键词酶定向进化突变基因文库高通量筛选方法 中图分类号 文献标志码 文章编号 随着生物催化剂在医药农业食品化工环境保护等领域的广泛使用定向进化技术也在不断成熟 酶作为最主要的生物催化剂其定向进化技术已被用来改造更广范围的酶分子六大类酶氧化还原酶转 移酶水解酶裂解酶异构酶连接酶分别通过定向进化技术在性质方面得到很大的改善以更好地应用 到工业生产上 然而定向进化技术的发展关键是构建质量高的突变基因文库和采用有效的高通量筛 选方法 本文主要就近几年这两方面的技术发展及应用做一详细介绍 突变基因文库的构建 无性进化技术 传统方法及近期应用实例 易错 是在 技术的基础上通过改变反应条件增加碱基错配率从而向 目的基因中引入随机突变的一种快速简便的无性进化技术 该技术由 等 于 年首次设计并 报道 并由 等 对其进行了完善是最早出现并实际应用的构建突变文库的方法在近几年应用