赤雹果水提取物镇痛作用及前列腺素E2关系探究.docVIP

赤雹果水提取物镇痛作用及前列腺素E2关系探究 　 作者：陈光晖 佟继铭 刘玉玲 宋利萍 【关键词】 赤雹果 水提取物 镇痛 前列腺素E2 Abstract：ObjectiveTo observe the relationship between PGE2 and the analgesic effect of the water extract of Thladiantha dubia fruits. MethodsThe analgesic effect of FTDB was evaluated by the classical writhing test. The content of PGE2 was detected in peritoneal fluid of mice.Results1.0, 2.0 and 4.0 g/kg of WEFTD markedly reduced the numbers of pain reaction induced by antimony potassium tartrate solution(Plt;0.05 vs model group) and obviously decreased the content of PGE2 in peritoneal fluid of mice (Plt;0.05 vs model group). ConclusionWEFTD has obvious analgesic effect and its one of mechanisms is to inhibit the synthesis or release of PGE2. Key words：Thladiantha dubia fruits； Water extraction； Analgesic； PGE2 赤雹(Thladiantha dubia Bunge,TDB)为葫芦科多年蔓生草本植物［1］，赤雹果是赤雹的干燥成熟果实，民间常用于治疗腰腿痛、风湿痛、痛经、软组织损伤等多种疼痛，还具有较强的抗炎和抗过敏作用，且无明显的毒副作用，是值得进一步研究的抗炎镇痛药。前期研究已经证明赤雹果水提取物（WEFTD）具有明显的镇痛作用［2］，其镇痛作用与阿片受体无关［3］。为进一步探讨赤雹果的镇痛作用机制，本实验采用小鼠扭体法对WEFTD的镇痛作用与PGE2关系进行了研究。 1 器材 1.1 动物 选用昆明种小鼠70只，体重20～22 g，雌雄各半，河北医科大学实验动物中心合格证号：医动字第04056号。实验前禁食12 h（自由食水）。 1.2 药物与试剂WEFTD，由承德医学院中药研究所制备。阿斯匹林，石家庄永强制药厂产品，批号001009。酒石酸锑钾，杭州临安金龙化工有限公司；吗啡，东北第六制药厂产品，批号0010109。PGE2试剂盒，南京建成生物工程研究所。氢氧化钾（KOH）化学纯上海泗联化工厂产品，批号970402。 甲醇（Methanal）分析纯,上海化学试剂厂产品，批号990405。 1.3 仪器岛津260紫外-可见分光光度计(日本)，DT-100A分析天平(北京光学仪器厂)，DHF-1高速分散器(上海金达生化仪器厂)，TLL-D台式冷冻离心机(军事医学科学院实验仪器厂)，WSZ-261-79恒温箱(上海医疗器械七厂)。 2 方法 2.1 小鼠扭体法［4］小鼠70只，禁食12 h（自由食水），取出60只，随机分为模型（NS）组，WEFTD低、中、高（1 000，2 000，4 000 g/kg）剂量组，吗啡（Mor）7.5 mg/kg组、阿斯匹林（Asp）200 mg/kg组,每组10只。 Mor皮下注射（Sc）给药；其它组灌胃给药(ig)，给药容积0.2 ml/10 g 体重，盐水组ig等容积的生理盐水。Sc给药后15 min，ig给药后40 min，腹腔注射0 .05%酒石酸锑钾0.2 ml /只致痛，观察小鼠产生“扭体”反应(腹部凹陷，躯干后腿伸直，臀部高起)，计数致痛后15 min内各小鼠的扭体反应次数，并按文献方法［2］计算扭体反应抑制率。 2.2 小鼠腹腔液中PGE2测定小鼠扭体反应记录15 min后,把上述60只小鼠及备用的10只对照组小鼠快速断头处死，撕开腹部皮肤浆膜，收集腹腔液2 ml，离心（2 500 r/min, 10 min, 4℃），取上清液0.5 ml，加入0.5 mol/L KOH-甲醇溶液2 ml，在50℃水浴中异构化20 min，用甲醇溶液稀释到5 ml，离心10 min（2 500 r/min），取上清液，在278 nm紫外光处测定。以吸收光密度值显示PGE2 的含量。 2.3 观察指标各给药组小鼠在酒石酸锑钾腹腔注射