超临界二氧化碳萃取迷迭香中迷迭香酸工艺探究.docVIP

超临界二氧化碳萃取迷迭香中迷迭香酸工艺探究 　 作者：陈四利，张冲，李嘉诚，冯玉红 张亚男，张德拉 【摘要】 目的研究萃取迷迭香中迷迭香酸的优选工艺条件。方法利用超临界CO2流体萃取技术，设计4因素3水平正交实验，结合高效液相色谱法对迷迭香酸进行定量分析。结果确定优选工艺条件为：萃取压力40MPa，萃取温度65℃，萃取时间1 h，夹带剂(乙醇)用量为0.60 ml·g-1。 结论该方法可靠性高、简便，可用于迷迭香中迷迭香酸的提取。 【关键词】 超临界CO2萃取； 高效液相色谱； 迷迭香 　　Abstract：ObjectiveTo study a new extraction process of components from Rosmarinus officinalis L. MethodsBy supercritical CO2 fluid extraction (SFE- CO2). The content of rosmarinic acid in the extract was tested by HPLC. ResultsThe optimum extraction process conditions were as follows: keeping pressure at 40 MPa and temperature at 65℃ for 1h, in the same time adding alcohol 0.60 ml·g-1. CondlusionThe established method is simple and reliable for the extration of rosmarinic acid in Rosemarinus officinalis L. 　　Key words：Supercritical CO2 fluid extraction; HPLC; Rosmarinus officinalis L. 　　迷迭香Rosmarinus officinalis L.，系唇形科（Labiatae）迷迭香属植物。原产地中海地区,现在世界各国广泛栽培。1981年由中国科学院植物研究所北京植物园引入我国［1］。目前，我国南方已广为栽种。迷迭香酸是在1958年由Ellis首次从迷迭香中分离得到，主要存在于唇形科﹑紫草科﹑葫芦科﹑椴树科﹑伞形科的多种植物中［2］，是一种天然抗氧化剂，具有抗炎、抗血栓、抗血小板凝集、抗病毒和抗菌等活性［3］，而且有很好的自由基清除和抗氧化作用，能抑制内皮细胞调节的低密度脂蛋白的氧化［4］。在药物应用上，德国Nattermann公司已将迷迭香酸作为解热、镇痛、抗炎药在市场上销售［5］。迷迭香酸属多酚类化合物，结构不稳定［6］，并且目前从迷迭香中提取迷迭香酸常用有机溶剂法，方法非常繁琐，通常还会有溶剂残留。超临界萃取技术是一种集提取、分离、浓缩为一体的新技术［7］，具有工艺过程简单、选择性强、无溶剂残留、不破坏物质活性等优势。 　　本实验采用超临界CO2萃取技术，通过设计正交实验优选萃取工艺，并用高效液相色谱法对萃取物中的迷迭香酸进行定量分析。 　　1 器材 　　1.1 仪器Spe- ed超临界萃取仪（美国ASI）；Waters高效液相色谱仪：Waters 2695 Separations Module, Waters 2487 Dual λ Absorbance Detector（美国Waters）；超声波清洗器（大连华洋科技有限公司）；LABOROTA 4000旋转蒸发仪（德国Heidolph）；电子天平（SHIMADZU）。 　　1.2 材料 迷迭香（购自福建）；液体CO2（广东佛山科的气体公司）；迷迭香酸对照品（纯度97％，天津一方科技有限公司）；甲醇（色谱纯，美国TEDIA）；甲酸，乙醇（分析纯，广州化学试剂厂）；双蒸水。 　　2 方法 　　2.1 超临界CO2萃取超临界萃取受很多因素的影响，根据设备情况，选取萃取压力、萃取温度、萃取时间、夹带剂4个对萃取效率有较大影响的因素，设计4因素3水平正交实验，以优选超临界CO2萃取迷迭香酸的工艺参数。因素水平表见表1。 　　表1 正交实验因素水平（略） 　　称取100 g迷迭香干叶，装入萃取釜，在一定压力和温度下进行超临界CO2萃取，以乙醇作为夹带剂，萃取完毕，收集萃取物，备用。 　　2.2 迷迭香酸测定方法 　　2.2.1 色谱条件色谱柱Waters C18（3.9 mm×150 mm）；流动相为甲醇－0.1％甲酸溶液（45∶55 V/V），流速1.0 ml/min；波长330 nm，AUFS 1.000 0，柱温25℃。 　　2.2.2 标准溶液配制 准确称取迷迭香酸标准品5.0 mg，置于25 m