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野鸦椿提取物抗炎镇痛效应探究 　 作者：李先辉，李春艳，贾薇，吕江明 【摘要】 　　目的研究野鸦椿（EJK）水提取物的抗炎镇痛效应。方法采用4种急性炎症模型和两种疼痛模型，包括角叉菜胶及蛋清诱导大鼠足趾肿胀、二甲苯致小鼠耳片肿胀、1%冰醋酸致小鼠腹腔渗出模型及扭体、热板法疼痛模型，观察EJK水提取物的抗炎镇痛作用。结果EJK水提取物小、中、大( 2，4，8 g/kg)3个剂量组对二甲苯致小鼠耳片肿胀，对角叉菜胶和蛋清引起的大鼠足跖肿胀，对急性炎症导致的皮肤和腹腔毛细血管通透性，对冰醋酸导致的慢性炎性疼痛、热板导致的疼痛均有不同程度抑制作用,其中EJK水提取物两个剂量( 4，8 g/kg)组与模型组相比有显著性差异（P＜0.01）。结论EJK水提取物具有较强的抗炎镇痛效应。 【关键词】 野鸦椿 抗炎 镇痛 野鸦椿(药材名为鸡眼睛)来源于省沽油科植物野鸦椿Euscaphis japoneca Kantiz，（EJK）的带花或果的枝叶，为贵州、湘西苗族常用药。味辛、甘，性平,具理气止痛、消肿散结的功效［1］，已有文献报道野鸦椿的枝叶有明显的抗炎作用［2］ 。但与野鸦椿“理气止痛，消肿散结”功效密切相关的抗炎镇痛作用系统研究还不够。本文采用实验性急性炎症动物模型及疼痛模型，观察EJK水提取物抗炎镇痛效果,为其临床应用提供理论提供依据。 　　1 　材料与仪器 　　1.1 动物昆明种小鼠, 18～22 g，雌雄各半，合格证号：001847；SD大鼠, 180～200 g，雌雄各半，合格证号：001847，由湖南长沙开福区东创实验动物服务部提供。 　　1.2 药物及试剂EJK水提取物由吉首大学药理实验室提供,传统方法水提、浓缩，临用时用蒸馏水稀释成所需浓度(实验所用剂量均以生药计)；吲哚美辛，山西临汾奇林药业有限公司生产，批号201005。二甲苯，江苏徐州试剂二厂产品，批号050720；角叉菜胶，青岛海洋所提供，用前1天以无菌生理盐水配制成10 g/L，放置4℃冰箱过夜备用；甲醇，甲酰胺，冰醋酸、氢氧化钾为分析纯。 　　1.3 仪器UV-260 可见-紫外分光光度计（日本岛津公司）；721可见分光光度计(上海亚研电子科技有限公司)；FA/JA型电子天平(上海精密科学仪器有限公司)；精度0.02 mm的游标卡尺(上海量具刃具厂)；SHH.W21.420型电热恒温水箱(天津市泰斯特仪器有限公司)；LXJ-ⅡB型离心机(上海安亭科学仪器厂)。 　　2 方法 　　2.1 EJK水提取物对二甲苯诱导小鼠耳肿胀模型的影响［3，4］昆明种小鼠50只，雌雄各半，随机分为5组：模型组（生理盐水），EJK小、中、大( 2，4，8 g/kg)3个剂量组，阳性药组(吲哚美辛，125 mg/kg)。每组动物按0.1 ml/10g连续灌胃给药5 d，模型对照组给予相同体积的生理盐水。末次给药30 min后，于小鼠右耳前后两面均匀涂抹二甲苯0.02 ml/只,左耳作对照，45 min后脱颈处死小鼠，沿耳廓基线剪下两耳，用直径为9 mm的打孔器沿左右耳片同一部位打下圆耳片，电子天平称重，计算肿胀度和抑制率（下式中给药组包括阳性药组和EJK水提取物组，肿胀度以每鼠左右耳片重量差表示。下同）。抑制率(% ) =(模型对照组肿胀度-给药组肿胀度) / 模型对照组肿胀度×100 %。 　　2.2 EJK水提取物对小鼠毛细血管通透性的影响［3］接上实验，于涂抹二甲苯后，立即尾静脉注射0.5%伊文思蓝溶液0.1 ml/10 g，同时腹腔注射1 %冰醋10 ml/kg ，45 min 后脱颈椎处死动物，用5 ml生理盐水冲洗腹腔,吸管收集腹腔液，离心取上清液于590 nm 处可见分光光度计测定吸光度A值 。按公式计算小鼠腹腔毛细血管通透性抑制率。腹腔毛细血管通透性抑制率( %) = (模型对照组腹腔液A 590 - 给药组腹腔液A 590 )/模型对照组腹腔液A 590 ×100 %；待“2.1”项实验中耳片称毕，将致炎右耳片浸入1 ml甲酰胺中, 38℃水浴48 h将染料渗出，离心取上清液于620 nm处可见分光光度计测吸光度A 值。按公式计算小鼠皮肤毛细血管通透性抑制率。皮肤毛细血管通透性抑制率( %) = (模型对照组液A620 - 给药组液A620 )/模型对照组液A620 ×100 % 　　2.3 EJK水提取物对角叉菜胶诱导的大鼠足跖肿胀模型的影响［3，4］大鼠50 只, 雄性,随机分为5 组：模型组（生理盐水），EJK水提取物小、中、大( 0.4，0.8，1.6 g/kg)3个剂量组，阳性药组(吲哚美辛，25 mg/kg)，每组动物按2 ml/100 g连续灌胃给药5 d，模型组给予相同体积的生理盐水。实验当天先用游标卡尺(精度0.02 mm)测所有大鼠右后肢足跖厚度