金雀异黄素对血管平滑肌细胞中活性氧生成影响.docVIP

金雀异黄素对血管平滑肌细胞中活性氧生成影响 　 作者：冯赞杰， 李琴山， 刘洋， 陆红玲， 余晓 【摘要】 　　目的： 探讨金雀异黄素对氧化型低密度脂蛋白（oxidized low density lipoprotein, oxLDL）诱导的血管平滑肌细胞中活性氧（reactive oxygen species, ROS）生成的影响。 方法： 以体外培养的人脐静脉平滑肌细胞（human umbilical vein smooth muscle cell, hUVSMC）为对象，用50 mg/L的oxLDL作用细胞2 h，并加入不同浓度金雀异黄素(10, 30, 90 μmol/L)对其进行干预，应用流式细胞技术和荧光分光光度法分别检测细胞内总ROS水平。结果： hUVSMC经oxLDL刺激2 h后，细胞内ROS水平明显升高（Plt;0.01）；金雀异黄素（10 μmol/L）降低oxLDL诱导的细胞内ROS的增加；金雀异黄素（30, 90 μmol/L）则进一步提高细胞内ROS水平。结论： 金雀异黄素（10 μmol/L）可清除细胞内ROS，而金雀异黄素（30, 90 μmol/L）则增加细胞内ROS的生成。 【关键词】 金雀异黄素； 活性氧； 氧化型低密度脂蛋白； 血管平滑肌细胞 　　［Abstract］Objective: To investigate the effect of genistein on reactive oxygen species(ROS) production in vascular smooth muscle cell(VSMC) induced by oxidized low density lipoprotein(oxLDL).Methods： Human umbilical vein smooth muscle cells were pretreated with genistein in different concentrations(10, 30, 90 μmol/L) and then treated by 50 mg/L of oxLDL for 2 hours. The levels of ROS were determined by using flowcytometry and fluorospectrophotometry. Results： The level of ROS in VSMC could be enhanced by oxLDL, genistein(10 μmol/L) might decrease the level of ROS induced by oxLDL, but when the concentration of genistein arrived at 30 μmol/L and 90 μmol/L respectively, it could further enhance the content of ROS. Conclusion： Genistein(10 μmol/L) might remove ROS, but genistein(30, 90 μmol/L) induced the generation of ROS in VSMC. 　　［Key words］genistein; reactive oxygen species; oxidized low density lipoprotein; vascular smooth muscle cell 　　金雀异黄素又名染料木黄酮，富含于豆类植物中，化学结构为5, 7, 4′三羟异黄酮，属于植物雌激素［1］。金雀异黄素具有心血管保护、抗肿瘤、抗氧化、防治骨质疏松、治疗绝经期综合征等多方面药理作用，有着广泛的应用前景。目前，关于金雀异黄素潜在的不良反应及毒性作用正在研究之中。已有研究发现，金雀异黄素的多种不良反应及毒性作用与其浓度有关，如高浓度金雀异黄素可导致鼠不育、胚胎畸形及神经毒性作用［2，3］；另外，金雀异黄素的某些作用具有双重性，如低浓度金雀异黄素可增加骨质的密度，而高浓度则对骨生成有抑制作用［4］。抗氧化作用是金雀异黄素的基本药理作用。Kruk等［5］报道，金雀异黄素可抑制活性氧（reactive oxygen species, ROS）的生成，抑制作用随金雀异黄素浓度增加而增强，呈剂量依赖关系。而我室研究结果与其有一定差异，现报告如下。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　金雀异黄素（Sigma公司，lot：G6649）；改良Eagle培养基（DMEM，Gibco公司，lot：1136551）