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- 2017-09-13 发布于福建
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鸡胚石蜡组织切片免疫组化中问题探析及方法改进
鸡胚石蜡组织切片免疫组化中问题探析及方法改进
作者:郑敏 毛建文 王伟章 李明 李红枝 王丽京
【摘要】 目的 总结鸡胚组织免疫组织化学染色中的操作经验。方法 应用常规免疫组化方法对不同发育时期的鸡胚石蜡组织切片进行免疫组化染色。结果 免疫组化的方法检测早期鸡胚发育中的相关抗体的表达定位准确,背景清晰。结论 注意鸡胚免疫组化的操作要点,有助于提高鸡胚组织的免疫组化染色质量。
【关键词】 鸡胚;HE染色;免疫组织化学
鸡胚材料因其价格低廉、经济实用而具有重要的实验价值,广泛应用于肿瘤学、中药学等研究领域[1]。而免疫组化方法是常用的病理学技术,为科研和教学提供了直观的形态学支持[2]。但由于市面上针对鸡的特异性抗体较少,在做鸡胚的免疫组化时常用鼠、兔或人等市面上易于得到的抗体,因此常出现一些非特异性着色等问题。笔者在对不同时期的鸡胚石蜡组织切片进行常规的HE染色方法和免疫组化染色时,发现了一些鸡胚组织普遍存在的问题,针对这些问题进行了探讨,并提出了改进的方法。
1 材料与方法
1.1 材料
本实验室种蛋来源于华南农业大学种鸡场。鸡胚孵化第3~8天,每天取5~10枚。将鸡胚内容物移入结晶皿中,小心取出胚胎,用生理盐水冲洗。整胚浸入4%(φ)多聚甲醛固定4~24 h。常规石蜡包埋,5 μm/片石蜡切片。
1.2 方法
1.2.1 HE染色 切片常规用二甲苯脱蜡,
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