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黄瓜香对小鼠免疫功能调节实验探究 　 作者：李春艳 李先辉 吕江明 高辉 【摘要】 　　目的研究黄瓜香水提物对小鼠免疫功能的影响。方法通过小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能测定、免疫器官重量法等方法，评价黄瓜香对小鼠免疫功能的影响。结果黄瓜香水提物０．８，０．４ ｍｇ／ｍｌ 剂量组与生理盐水组比较有显著性差异，能增加免疫器官重量，提高正常小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数，０．０４ ｍｇ／ｍｌ 剂量组无显著性差异。结论 黄瓜香水提物对小鼠非特异性免疫功能有促进作用。 【关键词】 黄瓜香水提物 免疫功能 吞噬百分率 　　Abstract：ObjectiveＴｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｔｈｅ ａｑｕｅｏｕｓ ｅｘｔｒａｃｔ ｆｒｏｍ Viola diffusa Ging（ＶＤＧ） ｏｎ ｉｍｍｕｎｅ fｕｎｃｔｉｏｎ ｉｎ ｍｉｃｅ．MethodsＴｈｅ ａｑｕｅｏｕｓ ｅｘｔｒａｃｔ ｆｒｏｍ Viola diffusa Ging ｗａｓ ｇｉｖｅｎ ｏｒａｌｌｙ ａｔ ｄｏｓｅｓ ｏｆ ０．８，０．４，０．０４ ｍｇ／ｋｇ ｆｏｒ ７ｄａｙｓ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ ｗｅｉｇｈｔｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｅ ｏｒｇａｎｓ ａｎｄ ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ ｍａｅｒｏｐｈｅｇｅ ｐｈａｇｏｃｙｔｏｓｉｓ ｅｘｐｅｒｉｍenｔ ｗｅｒｅ ｔａｋｅｎ ｔｏ ａｓｓｅｓｓ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｆｕｎcｔｉｏｎ ｉｎ ｍｉｃｅ．ResultsＩｔ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ａｑｕｅｏｕｓ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｆ ＶＤＧ ｃｏｕｌｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｔｈｅ ｗｅｉｇｈｔｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｅ ｏｒｇａｎｓ，ｅｌｅｖａｔｅ ｐｈａｇｏｃｔｉｃ ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ａｎｄ ｐｈａｇｏｃｙｔｉｃ ｉｎｄｅｘ ｏｆ ｐｈａｇｏｃｙｔｅ （P ＜０．０１）．ConclusionＩｔ ｓｕｇｇｅｓｔｓ ｔｈａｔ ｔｈｅ ａｑｕｅｏｕｓ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｆ ＶＤＧ ｃａｎ ｅｎｈａｎｃｅ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ． 　　Key words：Viola diffusa Ｇｉｎｇ；　Ｉｍｍｕｎｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ；　Ｐｈａｇｏｃｙｔｅ 　　近年来， 免疫功能低下日益受到国内外医学专家的广泛关注，其本身及所诱发的各种并发症可对人体健康造成严重的威胁。而我国传统医药在改善人体免疫功能方面具有独到的见解， 中药在调节人体免疫功能方面的作用日益受到人们重视。本研究以小鼠为模型， 观察了湘西民间中草药黄瓜香对免疫功能的影响。 　　1 材料 　　1.1 动物及分组健康昆明小鼠６０ 只，雌雄各半（６ ～８ 周龄，体重１８ ～２２ ｇ） ，由湘雅医学院实验动物中心提供。将小鼠随机分成空白组、生理盐水组、黄瓜香水提液大、中、小剂量组（以下简称水提大、中、小剂量组） 、香菇多糖组共６ 组，每组１０ 只。 　　1.2 用药黄瓜香水提物由吉首大学药理实验室提供，传统方法水提、浓缩，临用时用蒸馏水稀释成所需浓度（实验所用剂量均以生药计）；香菇多糖购自金陵药业股份有限公司福州梅峰制药厂， 产品批号：国药准字 　　2 方法 　　2.1 给药方法按人常用剂量，根据人／小鼠体表面积比，计算小鼠用药量。黄瓜香水提物大、中、小剂量分别为０．８，０．４，０．０４ｍｇ／ｍｌ， 香菇多糖０．６ ｍｇ／ｍｌ。灌胃１ 次／ｄ，每次０．１ ｍｌ／１０ ｇ ，连续灌胃７ ｄ。 　　2.2 鸡红细胞悬液制备无菌条件下，自鸡翼下静脉采血。置１００ ｍｌ 疫苗瓶中，加入相当于鸡血体积５ 倍的Ａｌｓｅｖｅｒ＇ｓ 溶液混匀，４ ℃冰箱贮存。临用时，用生理盐水洗涤３ 次，前２ 次离心速度为１ ５００ ｒ／ｍｉｎ ，离心５ ｍｉｎ ，弃上清液和界面的细胞层。最后连续２ 次离心（２ ０００ ｒ／ｍｉｎ ，５ ｍｉｎ） 直至细胞压积值恒定，用生理盐水配成体积分数为５ ％的红细胞悬液［１］ 。 　　2.3 腹腔吞噬细胞吞噬功能测定第７ 天给药后２ ｈ ，给小鼠腹腔注射鸡红细胞悬液１ ｍｌ ，间隔２ ｈ ，颈椎脱臼处死，仰位固定于鼠板上。中下剪开腹壁皮肤，经腹膜注入生理盐水２ ｍｌ 转动鼠板１ ｍｉｎ ，然后吸出腹腔洗液，平均分滴于２ 片载玻片上。晾干，以丙酮－甲醇溶液固定，晾干，用瑞氏染液染色１５ ｍｉｎ ，洗去染色液，晾干。在油镜下观察巨噬细胞吞噬的鸡红细胞的个数。按下列公式计算吞噬百分率和吞噬指数［２］ 。 　　吞噬百分率（%）=吞噬鸡红细胞的巨噬细胞总数观察到的巨噬细胞总数×100 % 　　吞噬指数（%）=被吞噬的鸡红细胞总数观察到的巨噬细胞总数×100 % 　　2.4 免疫器官重量实验动物处死后迅速取出胸腺、脾脏