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安肾胶囊对膜性肾病大鼠治疗作用实验探究 　【摘要】 目的：研究安肾胶囊对膜性肾病大鼠的治疗作用及机理。方法：将50只SD雄性大鼠制成膜性肾病大鼠模型，然后按24 h尿蛋白定量结果随机分为模型组、雷公藤多苷组、安肾胶囊高、中、低剂量组（n＝10），另外将10只未造模大鼠作为正常组。将各组大鼠分别灌胃4 w后，观察各组大鼠尿蛋白定量、血尿程度及肾脏组织病理学改变。结果：与模型组比较，安肾胶囊高、中、低剂量组和雷公藤多苷组大鼠的24 h尿蛋白定量降低、血尿减轻、肾脏组织病变减轻。结论：安肾胶囊对膜性肾病大鼠具有降低蛋白尿、控制血尿、修复肾小球病理损伤的作用，这可能是其治疗膜性肾病大鼠的作用机制。 【关键词】 安肾胶囊 膜性肾病 难治性肾病综合征 实验研究 安肾胶囊根据难治性肾病反复发作、病程长久、对激素依赖或使用激素治疗无效的特点创立，主要用于难治性肾病痰瘀互结证。本实验采用膜性肾病大鼠模型，运用安肾胶囊治疗，通过观察各指标的改变，研究本方药对肾病大鼠的治疗作用和机理。 1 材料与方法 1.1 实验材料 1.1.1 实验动物 SD雄性大鼠，体重（150±30）g，由国家药品监督管理局四川抗菌素工业研究所实验动物中心提供。实验期间饲养于室温（20±3）℃环境，相对湿度：70％，12 h光、12 h暗的条件下，自由摄食全价大颗粒，饮水，驯养1 w后使用。 1.1.2 药品及试剂 安肾胶囊浸膏：由成都中医药大学附属医院药厂提供，棕褐色浸膏，每毫升含生药3 g。雷公藤多苷片：湖南省株洲市制药三厂生产，批号：066002，10 mg/片。阳离子化牛血清白蛋白（C-BSA）、弗氏不完全佐剂：由四川大学华西医学中心提供。磺柳酸法试剂：成都中医药大学附属医院检验科自配。Buin＇s固定液、磷酸缓冲液（PBS）和2.5%戊二醛固定液：成都中医药大学附属医院药理研究室提供。 1.2 实验方法 1.2.1 造模 参照黄小平等［1］报告的大鼠原位性肾小球肾炎模型制作方法：取雄性SD大鼠70只，放入大鼠代谢笼中（每笼1只），收取大鼠24 h尿液，作常规测定。选取小便正常大鼠作为受试动物，除随机抽取10只作正常组外，其余50只大鼠均制成膜性肾病模型：（1）预免疫：取1 mL浓度为2 mg/mL的C-BSA溶液与弗氏不完全佐剂混匀的乳白色悬液，分别一次性于每只大鼠的双侧腋下、腹股沟处作多点皮下注射,观察1 w。（2）免疫：预免疫结束1 w后，每只大鼠尾静脉注射1 mL浓度为2.5 mg/mL C-BSA，每周3次，共3 w。整个造模时间共4 w，造模完成后取所有实验动物24 h尿液作24 h尿蛋白定量测定，根据检测结果进行分组。 1.2.2 分组 将造模后的50只大鼠，按24 h尿蛋白定量结果随机分5组，分别为模型组、安肾胶囊高剂量组（高剂量组）、安肾胶囊中剂量组（中剂量组）、安肾胶囊低剂量组（低剂量组)、阳性药物对照组即雷公藤多苷组。另外将10只同批大鼠作为正常组。 1.2.3 给药 造模4 w分组后灌胃，具体如下：正常组、模型组：每天灌服等容量（1 mL/100 g）的蒸馏水。安肾胶囊高、中、低剂量组：每天灌服剂量分别为5 g/kg、2.5 g/kg、1.25 g/kg的安肾胶囊混悬液。雷公藤多苷组：每天灌服剂量为0.03 g/kg的雷公藤多苷片混悬液。每天灌胃1次，连续4 w，大鼠每周称重1次，根据体重调整给药剂量。 1.2.4 指标观察及检测方法 1.2.4.1 24 h尿蛋白定量观察：收集大鼠24 h尿液，用磺柳酸法测定尿蛋白含量，24 h尿蛋白定量＝尿蛋白含量/L×24 h尿量。 1.2.4.2 血尿检测：收集每只大鼠24 h尿液，离心取上清液，采用H－100全自动尿液分析仪检测。 1.2.4.3 肾脏组织形态学变化：灌胃4 w后，将大鼠断头处死，立即分离肾脏，观察肾脏外观形态。随机间隔取材，取1个肾脏经肾门均匀纵切,随机间隔取样2块置于Bouins液中固定，逐级乙醇脱水，浸蜡，石蜡包埋，常规切片5 μm 2张，经“PAS＋苏木精”染色，常规光镜观察，另1个肾脏经肾门最大面均匀切取1/6，置于2.5％戊二醛中固定，送检经透射电镜观察、照相。 　 1.3 统计学方法 采用SPSS 11.0统计软件处理，计量资料数据以平均值加减标准差（■±s）表示，采用单因素方差分析，组间比较采用q检验；等级资料采用Ridit分析。 2 结 果 2.1 各组大鼠的一般情况变化 正常组：大鼠饮食如常，反应灵敏，活动正常，体毛顺滑有光泽，二便正常。其余各组在受试期间见：致病免疫2 w后，动物大多表现为蜷缩少动，精神萎靡，体毛蓬松少光泽，饮食量少，部分大鼠尿液呈茶红色，有明显腹水及呼吸道感染，大便干、少；经给药治疗后，大鼠精神好转，进食稍有