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实验性腹膜炎小鼠脾、肾钙调神经磷酸酶变化

实验性腹膜炎小鼠脾、肾钙调神经磷酸酶变化   作者:程建青 李海峰 范红斌 杜斌 杨志勇 【摘要】 目的: 观察实验性腹膜炎小鼠脾、肾钙调神经磷酸酶(CaN)在腹膜炎病程中变化。方法:36只小鼠随机分为6组,即腹膜炎48h、5d、10d、14d、21d组与对照组,腹膜炎组腹腔注射1%冰醋酸0.2mL,对照组腹腔注射等量生理盐水,每组各6只。采用比色法测定脾、肾组织CaN活性。结果: 脾CaN活性在实验性腹膜炎5d、10d、14d、21d呈持续性低水平(Plt;0.01);肾CaN活性在实验性腹膜炎10d达高峰14d、21d与10d相比呈下降趋势但仍高于对照组,差异有显著性。结论: 实验性腹膜炎小鼠脾、肾CaN活性变化与病程进展有关。 【关键词】 腹膜炎;脾;肾;钙调神经磷酸酶 【ABSTRACT】 Objective:AIM To investigate the alteration of calcineurin activity in spleen and kidney in experimental peritonitis mice.Methods:36 Kunming mice were randomly divided into 6 groups,which were experimental Peritonitis groups for 48h、5d、10d、14d、21d and control group.In the groups of experimental peritonitis,the model of nonspecific peritonitis was induced by injecting ice acetate acid into mouses peritoneal cavity,and the same quatity of normal saline was injected to animals in control group.CaN activity in spleen and kidney was measured by using PNPP as substrate.Results:CaN activity in spleen was significantly decreased in experimental peritonitis groups of 5d、10d、14d、21d compared with that of control group(Plt;0.01),while in kidney was increased for the groups of 10d、14d、21d( Plt;0.01or Plt;0.05) compared with that of control group.There was a peak time at 10d.Conclusion:CaN activity might be involved in functional regulation for spleen and kidney in experimental Peritonitis. 【KEY WORDS】 Peritonitis;Spleen;Kidney;CaN 钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)是迄今发现的唯一受Ca2+/钙调素(calmodulin,CaM)调节的丝/苏氨酸蛋白磷酸酶,参与了多种生理功能调节[1]。既往发现CaN在T淋巴细胞的活化和神经系统中发挥重要作用[2],CaN活性改变与多种疾病发生发展密切相关,本研究对实验性腹膜炎小鼠脾、肾CaN活性变化进行研究,为研究腹膜炎自愈过程中机体损伤和抗损伤机理提供理论依据。 1 材料与方法 1.1 动物分组及模型制备 选用健康昆明种小鼠36只,体重18~22g,由浙江实验动物中心提供。在标准饲养条件下,小鼠随机分为6组,即腹膜炎48h、5d、10d、14d、21d与对照组,腹膜炎组腹腔注射1%冰醋酸0.2mL,对照组腹腔注射等量生理盐水,每组各6只。 1.2 酶活性测定 无机磷法测定CaN活性,以每小时每毫克蛋白的CaN分解底物对硝基苯磷酸(PNPP)产生1μmol·L-1无机磷的量为一个活力单位(μmolPi/mgprot/hour)。考马斯亮蓝法测定组织蛋白含量。测定试剂购自南京建成生物工程研究所,按试剂盒说明制备脾、肾组织样本,操作按照说明书进行酶测定,考马斯亮蓝法测定组织蛋白。 1.3 统计学分析 运用 SPSS12.0 统计软件对数据进行统计处理。实验数据以平均值±标准差(x±s)表示,样本均数间比较采用单因素方差分析。   2 结果 小鼠腹腔解剖观察 实验组

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