深海沉积物真菌活性菌株的筛选及菌株WP-K-3的次生代谢产物的初步的分析研究.pdf

摘要 本文对采自西太平洋近赤道区深海沉积物中的海洋真菌进行了较为系统的分 离，从中筛选出抗菌、抗肿瘤、抑制乙酰胆碱酯酶(ACHE)及半胱氨酸蛋白酶活性 物质产生菌，并对其中一株高活性菌株的次级代谢产物进行了初步的研究，旨在发 掘具有潜在应用前景的活性菌株及其代谢产物，为深海沉积物真菌资源的利用及开 发新的微生物药物奠定基础。 些菌株发酵液乙酸乙酯提取物的抗菌、抗肿瘤、抗AChE及半胱氨酸蛋白酶活性进行 分析。结果表明：有36株对一种或多种指示菌有抑制作用，占总供测菌株的43．4％， 其中对大肠杆菌、金黄葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色假丝酵母和黑曲霉有抑制作 Raji细胞有抑制作用的菌株有14株，对两种肿瘤细胞都有抑制作用的菌株有44株， WP一0—3对Raji细胞的Ic。分别为5．0，1．1，2．8，1-9和0．5ug／mL。有7株菌株 具有抑制AChE活性，占供测菌株的8．4％。 采用形态学及分子生物学的鉴定方法对wP—K一3菌株鉴定，将其归类为黑曲霉 (Aspergiiiiusniger)。 采用有机溶剂萃取、硅胶柱层析和SephadexLH一20凝胶柱层析等分离纯化方 苯乙酸甲酯和5a，8a一环二氧麦角甾醇。 菌活性(即大肠杆菌、金黄葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色假丝酵母、黑曲霉)、抑 制AChE、胰蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶活性和抗氧化活性进行检测，结果显示，LS2、 ug／mL；另 外LS6和Ls8还有抗AChE活性，Ic。均为10ug／mL．4个化合物均没有抗菌、抗 肿瘤、抑制胰蛋白酶和半胱氨酸蛋白酶活性。 mmol／L，3．081mmol／L)，为非竞争性抑制作用。 本文结果表明，海洋沉积物真菌中蕴藏着丰富的抗菌、抗肿瘤及抗AChE等活性 物质产生菌株，是开发微生物新药的重要资源。 关键词：海洋沉积物；海洋真菌：代谢产物 Ⅱ Abstract Inthis isolatedfrommarinesediment from fungus samplesoriginated study，marine the screenedfor westofthePacificOceanbeside equator,were and activities inhibitory Acetylcholinesterase(AChE)inhibitoryCysteinepmtease furtherresearchonits ofthestrainswith waschosenfor activities．One highactivity andtheir metabolites．Thisaimsat bioactivestrains secondary study findingpotential afoundationon and marinesediment metabolites，thus exploringutilizing fungus lays andnewmicrobial