水稻蛋白激酶的规模化克隆、表达及活性研究（简报）.PDFVIP

第 卷 第 期 40 3 分子细胞生物学报 年 月 20076 June 2007 JournalofMolecularCellBiology * 水稻蛋白激酶的规模化克隆、表达及活性研究（简报） 1 1 1 2 1 3 1* 李莉云 孙 健 王海娇 刘 茜 刘丽娟 陶 勇 刘国振 1 2 （河北农业大学生命科学学院，保定 ； 河北省农林科学院粮油作物研究所，石家庄 ； 071000 050051 3中国科学院遗传与发育研究所，北京 ） 100101 关键词：水稻激酶 克隆 表达 自我磷酸化 蛋白激酶几乎与所有重要的发育代谢过程有 其激酶区内的跨膜结构域，由此设计相应的扩增引 关，已知在植物的发育、自交不亲和、雄性不育、抗 物，引物序列见表 。此外，在正、反向引物的 端均 1 5′ ［］ 逆和抗病等生命活动过程中起重要的调控作用1。 设计了一段与载体同源的序列作为二次 的引 PCR 蛋白激酶在各种生物中广泛存在，根据网络公布的 物（通用引物），序列分别为 ! 水稻全基因组序列图谱，通过同源序列比对， 和 TIGR CACGGTGGTGGT ! 共找到了 。 ACGATGAA RiceGenomeAnnotation-1532Release4 ［］ 2 一次 扩增以水稻基因组 为模板，扩 个具有激酶结构域的蛋白质（ ），拟南芥中 PCR DNA PF00069 ［］ 也存在 个激酶1，这些激酶与它们的上下游蛋 增条件为： ； ， ， 1053 94℃5min94℃1min60℃1min72℃ 白质组成了一个复杂而有序的网络，调节着植物的 ， 个循环； 延伸 。二次 扩增 1.5min30 72℃ 10min PCR 正常生长发育和对外界环境的反应。 条件为： ； ， ，