第9章节 细菌和病毒的遗传作图.ppt

细菌病毒 是研究得比较清楚的病毒。 噬菌体侵染细菌后在均匀生长的细菌培养板上形成噬菌斑（plaque）。 根据噬菌斑的形态和生长特点可以鉴别不同的噬菌体。 T4噬菌体形态 T4 phage的结构模式 噬菌体的分类 按其在宿主细胞中的生活方式分为： 温和噬菌体：在噬菌体侵入后，细菌并不裂解，而是 以溶源体或质粒的形式存在的一类噬菌体称为温和性噬 菌体。 烈性噬菌体：噬菌体侵入宿主细胞，利用宿主细胞内 的物质进行自身合成子噬菌体，并使宿主细胞裂解而释 放子噬菌体，这类噬菌体称为烈性噬菌体。 烈性噬菌体virulent phage 具有溶原性（lisogeny）的生活周期。 侵入细菌以后，细菌细胞并不马上裂解。 λ噬菌体（λ phage） 侵入细菌后，细菌并不裂解。 λ噬菌体的DNA通过交换整合到细菌染色体上。 随着细菌DNA一起复制。 溶原性细菌（lysogenic bacterium）。  DNA整合在寄主染色体中的噬菌体称为原噬菌体（prophage）。 溶源周期→裂解周期： 原噬菌体通过诱导（induction）可转变为烈性噬菌体，进入裂解周期。 诱导方式：UV、温度改变、与非溶原性细菌接合等。 诱导使阻遏物失活，噬菌体的基因表达，进入裂解周期。 P1 噬菌体( P1 phage) 感染E.coli以后，不整合到细菌DNA上，而是独立存在于寄主细胞内。 不影响宿主细胞的正常代谢 P1 DNA 自主复制，并分配到宿主的子细胞中去，而且可以多于一个拷贝。 受P1 噬菌体感染的细菌也可以因诱导而进入裂解周期。 一个正常的T2 phage产生的噬菌斑小而边缘模糊，记为r＋； 突变体r-产生的噬菌斑大而边缘清晰。 r- T2 噬菌体是速溶（rapid lysis）突变体。 正常的T2 噬菌体能感染E.coli B株，h＋。 E.coli的突变型B/2株能抗T2的感染。 h＋的突变型h-能克服B/2株的抗性，既能侵染B株又能侵染B/2株。 T2 phage 和 E.coli的关系 混合感染（mixed infection）： 两个基因型不同的噬菌体同时感染一个宿主细胞，又称为双重感染（double infection）。 共同生存在同一个宿主细胞中的两个噬菌体DNA也可以发生交换，产生基因重组。 T2 基因重组试验： 用基因型为r＋h- 和 r-h＋的两种T2 噬菌体同时感染E.coli B株（双重感染）。 将双重感染后释放出来的子代噬菌体接种在同时长有B株和B/2株的培养板上，记录噬菌斑的数目和形态。 h＋r－ 半透明，大 h－r＋ 透明，小 h－r－ 透明，大 h＋r＋ 半透明，小 T2 plaques T2 phage重组试验结果 根据上表结果可以分别作出3个连锁图 有四种可能的排列顺序 Kaiser(1955)，λ噬菌体的重组作图。 用UV照射获得了5个λphage的突变型： s型，噬菌斑较小， mi型，噬菌斑特别小， c型，噬菌斑完全清晰， co1型，噬菌斑中间模糊，四周清晰， co2型，噬菌斑的中部较co1型更为浓密。 λ噬菌体s co1 mi × ＋ ＋ ＋的杂交结果及分析作图 λ噬菌体s co1 mi 基因连锁图 细菌遗传物质的重组有四种不同的方式： 转化（transformation） 接合（cojugation） 性导（sexduction） 转导（transduction） 一、转化（transformation） 细菌通过细胞膜摄取周围环境中DNA片段，并通过重组将其整合到自身Chr中，而使它的基因型和表现型发生相应变化的现象。 trp2+his2+tyr1+ （供体）×trp2-his2-tyr1-（受体）的转化类型及重组率计算 在原核生物中，两个细胞在相互接触过程 中，遗传物质从一个个体转移到另一个个体的 现象称为接合。 细菌的接合试验 接合过程示意图 Hfr菌株的形成及其基因转移 部分二倍体： 当Hfr菌的部分染色体进入F－细胞后，F－细胞中就成为部分二倍体（partial diploid）或部分合子（merozygote）。 新转入的DNA片断称为供体外基因子（exogenote），而受体的染色体称为受体内基因子（endogenote）。 部分二倍体及其交换 中断杂交试验 Hfr中的DNA向F－转移时，是从酶切端点开始直线式进行的。 因此可以用于基因作图。 中断杂交试验： Hfr：strs thr+ leu+ azis tonAs galb+ lac+ F－：strr thr- leu- azir