生物课件23动物的克隆2010.ppt

第二章 克隆技术 定义： 当原代培养的细胞处于接触抑制后, 用胰蛋白酶处理,使细胞从瓶壁上脱离下来,然后加入新的培养液,将细胞分离稀释,并从原培养瓶内转接到新的培养瓶内,这个过程称传代培养.（分瓶培养的过程） 　　科学从来都是一把双刃剑。但是，某项科技进步是否真正有益于人类，关键在于人类如何对待和应用它，而不能因为暂时不合情理就因噎废食。克隆技术确实可能和原子能技术一样，既能造福人类，也可祸害无穷。一方面，它能给人类带来许多益处。诸如保持优良品种、挽救濒危动物、利用克隆动物相同的基因背景进行生物医学研究等；另一方面，它将对生物多样性提出挑战。生物多样性是自然进化的结果，也是进化的动力，有性繁殖是形成生物多样性的重要基础，而“克隆动物”则可能会导致生物品系减少，个体生存能力下降。 如何迎接“克隆时代”的挑战 在第四章生物技术的安全性和伦理问题中会有所介绍。 动 物 组 织 培 养应用 胚胎或幼龄动物的脏器 分散成单个细胞的细胞悬浮液 机械消化、胰蛋白酶消化 原代细胞 传代培养 细胞株或细胞系 接触抑制 动物组织培养技术的发展 原代培养：从机体取出后立即进行的细胞、组织培养。 (一般繁殖到一定代数后停止生长，需要重新更换培养基） 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。 * 2001年，董雅娟、柏学进成功地克隆出我国首例和第二例健康成活的体细胞克隆牛“康康”和“双双” 第三节 动物的克隆 基本要求: 1.简述动物细胞组织培养与体细胞克隆 2.说出动物组织培养技术的发展历程 3.描述细胞系及细胞株的含义 4.简述动物的克隆培养法 5.描述动物细胞全能性的表现程度，说出动物难以克隆的原因 6.简述动物细胞核移植的概念和核移植的程序 发展要求:列举动物细胞培养与动物细胞核移植的应用和发展前景 说明:1.“动物的细胞融合技术及应用”不作要求。只提供学生阅读，不要求学生记忆或掌握具体有关内容。2.“小资料：我国科学家在动物组织培养方面的贡献；多莉诞生不容易”只作为背景材料供学生阅读，不要求学生记忆或掌握具体有关内容。 第三节 动物的克隆 动物克隆的基础是动物细胞、组织培养 一、动物细胞的培养和克隆形成 1、广义的动物组织培养(组培)包括： 2、动物组织培养技术的发展： 1885年，鸡神经板在生理盐水中培养成活。 1903年，皮肤及白细胞培养于腹水及血清中，存活1个月。 1907年，美，蛙胚神经管培养在蛙淋巴液中，观察到细胞的阿米巴运动，创立了悬浮培养法。 细胞培养、组织培养和器官培养。 3、动物细胞培养过程 胰蛋白酶 机械消化 克隆 原理：细胞增殖（有丝） 结果：细胞群，细胞产物 。 定义：人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。 机械 消化、胰蛋白酶处理 取出 组织 胚胎或幼龄动物器官组织 剪碎 单个细胞 细胞悬液 转入培养瓶内培养 （ 贴壁生长长成单层细胞。有接触抑制现象）。 ①原代培养 3：过程 原代培养 1、无菌、无毒 : （消毒、灭菌 ；定期更换培养液，清除代谢废物 ） 2、营养 : 液体合成培养基—— 无机物：水、无机盐、微量元素； 有机物：糖、氨基酸、促生长因子等；通常还需加入血浆、血清等天然成分。 ） 3、温度和pH （36.5±0.5℃，PH7.2---7.4 ） 4、气体环境： 动物细胞培养的条件: “95％空气+5％CO2”的混合气体培养箱。 氧气是细胞代谢必须的；CO2维持培养液的PH。 问题3：为什么用胰蛋白酶处理？ 问题1：、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？ 因为其细胞生命力旺盛，分裂能力强，分化程度低。 问题2、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？ 扩大细胞与培养液的接触面积，利与细胞吸收营养。 动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，胰 蛋白酶处理动物组织，可以使动物组织细胞间的蛋白质和 细胞外的其他成分酶解，获得单个细胞。 问题4：为什么用胰蛋白酶处理而不用胃蛋白酶？ 动物细胞培养的最适PH值为7.2-7.4，胰蛋白酶作用的适宜PH为7.2-8.4，胃蛋白酶适宜PH为2.胃蛋白酶在PH为7.2-7.4的动物细胞培养中无活性。 问题5：用胰蛋白酶处理不会把所培养的细胞消化掉吗？ 控制好时间！长时间处理当然会损伤细胞。 问题6、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基有何独特之处？ 问题7、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？ 主要成分：（葡萄糖、氨基酸）、（水、无机盐）、维生素和动物血清等。独特之处有：1、液体培养基