第九章色谱分析chromatography.pptVIP

第九章 色谱分析chromatography第一节 色谱的定义与分类 一、色谱分析定义 组分在固定相和流动相之间被分离的一种物理方法。 *利用样品各组分在固定相与流动相中受到的作用力不同，而将待分析样品中的各组分依次分离，然后顺序检测组分含量的分离分析方法 二、色谱法分类 1、按固定相及流动相的状态分类 气相色谱：气液色谱、 气固色谱 液相色谱：液液色谱、 液固色谱 2、按固定相形状分类 　　 柱色谱、纸色谱、薄层色谱。 3.按色谱过程的物理、化学机理分类 (1) 吸附色谱：用固体吸附剂作固定相的色谱。它是利用组分在吸附剂上吸附力的不同，因而吸附平衡常数不同而将组分分离的色谱。 (2)分配色谱： 用液体作固定相，利用组分在液相中的溶解度不同，因而分配系数不同而进行分离的色谱。 (3)离子交换色谱： 利用离子交换原理而进行分离的色谱。 (4) 排阻色谱: 利用分子大小不同而进行分离的色谱。 (5) 电色谱：利用带电物质在电场作用下移动速度不同进行分离的色谱。 4、亦可按仪器分: （1）气相色谱( Gas chromatography ) 填充柱气相色谱（Packed column gas chromatography） 毛细管气相色谱 (Capillary column gas chromatography) 裂解气相色谱(Pyrolysis gas chromatography ) 顶空气相色谱 ( Headspace gas chromatography) 气相质谱联用技术（Gas chromatography-Mass spectrometry） （2）液相色谱仪( Liquid chromatography ) 高效液相色谱( High performance liquid chromatography) 超临界流体色谱( Supercritical fluid chromatography) 高效毛细管电泳(High performance capillary electrophoresis) 毛细管电色谱(Capillary electrochromatography) 液相质谱联用技术（Liquid chromatography- Mass spectrometry） （3）平面色谱法（Planar chromatography） 薄层色谱 ( Thin layer chromatography) 薄层电泳色谱 (Thin layer electrophoresis ) 纸色谱( Paper chromatography) 第二节 色谱学基本理论 一色谱分析的共同点 色谱分析都有两个相：流动相与固定相 被分离的组分对流动相与固定相有不同的作用力 K=Cs/Cm K 分配系数 Cs 组分在固定相中的浓度 Cm组分在流动相中的浓度 二、色谱图的重要参数 1、色谱峰 峰宽 (用 W 或 Y 表示)； 峰高 (用 H 表示) 半峰宽 (用 W 1/2 或 Y 1/2 表示,亦有用 2△X 1/2表示) 标准偏差 (用σ表示)。标准偏差亦称曲折点峰宽，即峰高0.607处峰的宽度。 与峰宽和半峰宽的关系如下式表示： Y=4σ Y 1/2 = 2 σ√2 Ln2 = 2.355σ 2 保留值 时间保留值 死时间 t0R 从进样至情性组分出现浓度极大点时的时间。 保留时间 tR 从进样至组分出现浓度极大点时的时间。 校正保留时间 tR tR= tR - t0R 体积保留值 死体积 V0R V0R = t0R · FC； FC -流动相的流速 保留体积 VR VR = tR· FC 校正保留体积 VR VR = t R · FC 三、色谱分离的重要参数 1、相对保留值 (α) 亦称分离因子或选择性因子 α＝ t ’R1/ t ’R2 2、分配比 (K)和相比 (β) 分配比亦称分配容量，容量比，容量因子或质量分配比。是指平衡时，组分在固定相和流动相中的质量比。 k‘值一般控制在3-7之间。 3、塔板数（N） 组分在柱中固定相和流动相中反复分配平行的次数。N越大，平衡次数越多，组分与固定相的相互作用力越显著，柱效越高。 N=16(tR/Y)2 4、分离度（R） 分离度亦称分辨率。是指相邻两个峰的分离程度。 四、各种参数对分离的综合影响 1.分离度与k的关系 决定洗出峰位置，k值一般控制在3-7之间。 改变k有如下办法: A.改变流动相或固定相 B.改变温度可以控制k 。 特别是对于GC，可采用程序升温。对于LC，温度会影响柱效。 2.分离度与柱效N