生化物质的分离纯化技术.pptVIP

生化物质的分离纯化技术 生化物质分离纯化技术包括：生化产品的分离分析和生化产品的制备。 生物产品的制备中的分离方法多采用温和的“多阶式”方法进行，即常说的“逐级分离”方法。 一、分离纯化原理 （1）根据分子形状和大小不同进行分离。如差速离心与超离心，膜分离（透析、 电渗析）与超滤法，凝胶过滤法。 （2）根据分子电离性质（带电性）的差异进行分离。如离子交换法，电泳法，等电聚焦法。 （3）根据分子极性大小及溶解度不同进行分离。如溶剂提取法，逆流分配法，分配层析法，盐析法，等电点沉淀法及有机溶剂分级沉淀法。 （4）根据物质吸附性质的不同进行分离。如选择性吸附与吸附层析法。 （5）根据配体特异性进行分离——亲和层析法。 二、分离纯化的程序和生产设计 （1）确定制备物的研究目的及建立相应的分析鉴定方法； （2）制备物的理化性质稳定性的预备试验； （3）材料处理及抽提方法的选择； （4）分离纯化方法的摸索 （5）产物的均一性测定。 1．分离纯化初期使用方法的选择 早期分离方法的选择原则是从低分辨能力到高分辨能力，而且负荷量较大者为合适，用萃取，沉淀，吸附等一些分辨力低的方法较为有利，这些方法负荷能力大，分离量多兼有分离提纯和浓缩作用，为进一步分离纯化创造良好的基础。 2．各种分离纯化方法的使用程序 生化物质的分离都是在液相中进行，故分离方法主要根据物质的分配系数，分子量大小，离子电