O139群血清明显凝集的菌落.PPTVIP

霍乱的实验室检测 霍乱弧菌在庆大培养基上菌落形态。(菌落呈现无色 、圆形半透明、湿润、扁平或稍突起、边缘整齐，由于亚碲酸钾的作用，菌落中央常呈灰色或灰黑色） O1群和O139群抗原构造与血清分型 国内商品化的霍乱检测血清 国外血清：日本生研，泰国SA血清等 针对原始样品（如病人粪便）以及初始增菌后的菌液进行快速检测 胶体金快速检测卡 ?O1群霍乱胶体金标记快诊卡 ?O139群霍乱胶体金标记快诊卡 荧光PCR快速检测试剂盒 ?O1群、 O139群双色荧光检测试剂盒 ?霍乱CTX毒力基因荧光检测试剂盒 注：快速检测并不能替代常规检测的进行，只是作为辅助检测的一种手段 O1群和O139群霍乱弧菌的检验程序 检测工作中应关注的事项 生物安全与个人防护（生物安全2级实验室操作，做好个人防护，整个培养流程产生的实验培养废弃物和均应进行高压灭菌消毒） 培养基的配备与质量控制（是否新鲜，含量、PH值、保存条件是否达标，分离平板、血清、生化鉴定等检测试剂质量是否满足要求，是否在有效期内使用等） 可疑阳性结果的及时规范上送（当出现可疑阳性菌株时，要第一时间进行分纯并进一步对分纯物进行血清学确认，应上送分纯后的培养物而不是初始平板！！） 做好样品的相关登记记录。 * * 什么是霍乱? 霍乱是由01群和0139群霍乱弧菌（V．cholerae）引起的急性肠道传染病，发病急、传播速度快、波及范围广、危害严重的甲类传染病。 霍乱概述 古典生物型 小川型 Ogawa (AB) O1群 稻叶型 Inaba (AC) 埃尔托生物型 彦岛型 Hikojim (ABC) 霍乱弧菌 霍乱病原菌 O139群（Bengal） 非O1群 O2-O200群 腹泻病原菌 毒 素 霍乱肠毒素(CT) ：前噬菌体基因编码 小带联结毒素 Zot 增加肠黏膜通透性 副霍乱肠毒素Ace 肠段积液 侵袭力 鞭 毛 菌毛：acf、tcpA 致病物质 CT的结构 B亚单位：与小肠粘膜上皮细胞GM1神经节苷脂受体结合； 由1个A亚单位和5个B亚单位构成的多聚体，不耐热。 （前噬菌体基因编码） 1A+5B 所致疾病：烈性肠道传染病霍乱 传染源:病人/无症状带菌者,人是霍乱弧菌的唯一易感者 传播途径：粪-口途径 流行特征：地方性、季节性。 霍乱典型临床特征 患者出现上吐下泻，泻出物呈“米泔水样”。 并发症有血容量减少， 循环衰竭及肾功能衰竭，导致尿闭、电解质、酸碱平衡失调导致肌肉痉挛。 免疫性 感染后可获牢固免疫力；再感染少见 局部黏膜免疫；抗菌抗体（O）；抗毒素抗体（B） O1群与O139群不存在交叉免疫保护作用。 病原体 O1群，O139群霍乱弧菌 发病特征： 剧烈腹泻、呕吐、严重脱水时致酸中毒、循环衰竭而致死亡 不治疗或医疗很差的条件下病死率可达到20－50％（重症病人达70－100％） 培养特性： 营养要求不高，兼性厌氧，37℃生长，怕酸嗜碱， pH:7.4-9.6快速生长 检验依据： WS 289-2008 《霍乱诊断标准》 霍乱防治手册（1999年第五版） 霍乱的实验室检测 样品的采集和运输 不同样品的病原分离流程及技术要点 ?粪便 ?水体 ?水产品，食品等 平板分离及可疑菌落挑取 菌落鉴定 常用快速检测方法 ?胶体金检测条 ?荧光PCR检测 检测工作中应关注