单核细胞激活及Th1-Th2细胞因子变化及肾综合征出血热病情关.docVIP

单核细胞激活及Th1/Th2细胞因子变化及肾综合征出血热病情关 　 作者：孙志坚， 王锁荣， 马志俊， 张东军 【摘要】 目的 研究单核细胞激活状态及Ⅰ∕Ⅱ型辅助性T细胞（Th1／Th2）细胞因子的变化与肾综合征出血热（HFRS）病情的关系。方法 34例HFRS患者（轻症组19例，重症组15例）按病期采血，分别用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清新喋呤（NP）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、白细胞介素（IL）-12与γ-干扰素（IFNγ）含量,放射免疫法（RIA）检测IL-10，自动生化仪检测血尿素氮（BUN）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）和血小板（Pt）计数；另取20名健康者作对照。结果 HFRS急性期血清新喋呤、MCP-1、IFNγ、IL-12皆显著高于对照组水平，峰值一般出现在低血压少尿期［分别为（186.12±115.27）μmol∕L vs （7.14±4.68）μmol/L,P＜0.01；（604.83±653.05）μg/L vs （182.48±51.97）μg/L, P＜0.05；（9.64±12.12）μg/L vs （0.36±0.27）μg/L,P＜0.01；（1.29±0.68）μg/L vs （0.54±0.08）μg/L P＜0.01］；重症组之水平稍高于轻症组，其变化曲线与BUN、ALT的变化趋势基本一致，而与血小板的变化趋势相反。血清IL-10在病程中虽也升高，但其增加幅度远不及IFNγ，故而IFNγ/IL-10比值于病程前三期显著升高。结论 HFRS急性期血清新喋呤、MCP-1、IFNγ、IL-12皆显著升高,与病情轻重有关联, 提示T细胞-巨噬细胞轴过度激活、MCP-1过度表达、Th1/Th2及促炎/抗炎失平衡，在HFRS发病机制中起重要作用。 【关键词】 肾综合征出血热； 新喋呤； 单核细胞趋化蛋白-1； 白细胞介素-12； γ-干扰素； 白细胞介素-10 肾综合征出血热（HFRS）是由汉坦病毒引起的自然疫源性疾病，目前五大洲至少有30多个国家发生过疫情报告,而我国受害最为严重,罹患人数占全世界总发病人数的90％左右。近年来，发病率虽有所下降，但新疫区仍在扩大，病毒有不同程度的变异，流行情况不容乐观。为阐明本病的发病机制，我们研究了血清新喋呤（NP）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、白细胞介素（IL-12）、γ-干扰素（IFNγ）与IL-10的变化，以了解单核细胞激活及Th1/Th2极化状态与HFRS病情的关系，现将结果报告如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料 2006年1月~2007年3月因患HFRS而住院的患者共34例纳入了研究对象，男25例，女9例，年龄18~62(平均44)岁，入院病日为（4.1±1.1）天，皆经血清学检查HFRS特异性IgM阳性而确诊。按1997年卫生部颁布的流行性出血热诊断标准分型，其中轻型3例，中型16例，重型13例，危重型2例；为便于比较，将轻型与中型合并为轻症组，重型与危重型合并为重症组。低血压期一般仅持续数小时，又常与少尿期重叠，故将此二期合并统计；另取20名健康成人作为对照组。 1．2 方法 1．2．1 治疗方法 所有患者均接受以液体疗法为主的对症治疗，未使用免疫调节剂。 1．2．2 新喋呤、趋化因子、细胞因子的检测 按病期采血，分离血清后置-80℃备检；新喋呤、MCP-1、IL-12、IFN-γ均采用ELISA方法检测，试剂盒分别购自德国IBL公司、比利时Biosource公司和法国Diaclone公司（IFNγ）；IL-10用放射免疫法（RIA）检测，试剂盒购自解放军总医院科技开发中心放免所。为避免反复冻融而影响检测结果，故取其中16例检测NP、MCP-1与IL-12，另18例检测IFNγ与IL-10。 1．2．3 血尿素氮（BUN）、血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、血小板计数的检测 采用自动分析仪检测。 1．2．4 统计学方法 用Microsoft excel 2000软件进行数据处理，以平均数±标准差（±s）表示各样本数据，组间差异用双尾t检验。 2 结果 2．1 血清新喋呤、MCP-1的变化 从发热期开始轻、重两组血清新喋呤含量便显著升高，低血压、少尿期上升至高峰，多尿期以后渐有下降，但至恢复期仍未降至正常水平；重症组的变化曲线高于轻症组，在发热期，轻、重两组间有统计学差异, 重症组显著高于轻症组，P＜0.05（见表1，图1，2）。 MCP-1的变化曲线与NP相似，各病期水平均高于对照组，在病程前三期，重症组略高于轻症组，但差异无显著性；（见表1，图1）。表1 HFRS患者血清Np、MCP-1、IL-12的动态变化注：与对照组相比，*Plt;0.05, **Plt;0.01；与轻症组相比，△△Plt