胃癌eIF4E及cyclin D1表达及其临床病理意义.docVIP

胃癌eIF4E及cyclin D1表达及其临床病理意义 　【摘要】 目的 研究真核细胞起始因子4E（eIF4E）及cyclin D1在胃癌中的表达及临床意义，探讨eIF4E与cyclin D1之间的相关性。方法 应用免疫组化的方法检测91例胃癌及30例正常胃组织中eIF4E及cyclinD1的表达。结果 eIF4E、cyclin D1在正常胃组织中均为阴性表达，在胃癌组织中的阳性表达率分别为95.6%（87/91）和84.6%（77/91）。eIF4E及cyclin D1表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移以及临床分期有关（Plt;0.05），但与肿瘤组织学分化程度、年龄、性别无关。胃癌组织中eIF4E与cyclin D1表达密切相关（Plt;0.05）。结论 检测eIF4E和cyclin D1表达水平，对于判断胃癌的恶性程度有重要意义。 【关键词】 胃癌 真核细胞起始因子4E cyclin D1 　　0 引言 　　真核细胞起始因子4E（eukaryotic initiation factor 4E，eIF4E）是mRNA帽结合磷蛋白，是蛋白合成的限速因子。有研究表明，eIF4E表达水平在一些人类肿瘤组织和肿瘤细胞株中显著升高[1]。细胞周期素D1（cyclin D1）可通过与细胞周期素依赖激酶4（CDK4）结合形成复合物加快细胞由G1期进入S期，正调节细胞增殖周期，并在包括胃癌在内的多种肿瘤中表达增高[2]。本研究采用免疫组织化学方法检测eIF4E和cyclin D1在胃癌组织中的表达，旨在探讨二者与胃癌临床生物学行为的相关性。 　　1 资料与方法 　　1.1 临床资料 　　收集2002年10月～2004年10月我院及湖北省肿瘤医院手术切除并经病理学证实的胃癌组织标本91例，男61例，女30例，年龄32～76岁，平均年龄51.2岁。按胃癌协作组制定的有关胃癌大体分型、组织学分型和临床病理分期等规范进行严格的病理诊断来判断肿瘤转移情况；91例胃癌石蜡包埋标本中，高分化腺癌31例，中分化18例，低分化39例，未分化3例；侵犯浆膜者58例，未侵犯浆膜者33例；有淋巴结转移53例，无淋巴结转移38例；TNM分期：Ⅰ期14例，Ⅱ期22例，Ⅲ期45例，Ⅳ期10例。所有患者术前均未接受化疗和放疗。另选择同期胃镜及活检组织学正常的胃粘膜标本30例作为研究对照。所有标本经合理取材后用10%中性福尔马林溶液固定，经梯度酒精脱水后浸入二甲苯中，常规石蜡包埋，制成厚5μm的组织切片。 　　1.2 试剂和方法 　　鼠抗人eIF4E单克隆抗体、 鼠抗人cyclin D1单克隆抗体均为Santa Cruz公司产品。 免疫组化二步法试剂盒为Antibody Diagnostic公司产品。 DAB显色试剂盒购于北京中山生物技术有限公司。 免疫组化染色程序严格按试剂盒说明书操作。 eIF4E抗体及cyclin D1抗体的工作浓度均为1∶200，染色时均需微波修复抗原。实验中采用PBS代替一抗作为阴性对照，光镜下观察阳性反应呈棕黄色。 　　表1 胃癌组织中eIF4E和cyclin D1的表达与临床病理特征的关系（略） 　　1.3 结果判定 　　eIF4E阳性细胞为细胞浆深染成棕黄色颗粒，cyclin D1阳性细胞为细胞核深染成棕黄色颗粒；在此基础上，参照文献判断标准[3,4]，以阳性细胞数＜10%为阴性表达，阳性细胞数≥10%为阳性表达。 　　1.4 统计学处理 　　采用SPSS11.0统计软件包进行分析。计数资料用χ2检验和四格表确切概率法以及计数资料的相关性分析。以Plt;0.05为显著性检验水准。 　　　2 结果 　　2.1 胃癌组织中eIF4E表达 　　eIF4E阳性染色主要见于胃癌细胞的胞浆，棕黄色颗粒弥漫分布整个胞浆或沿核膜周边分布(见图1～4）。91例胃癌组织中，87例eIF4E表达呈阳性，阳性表达率为95.6%；而30例正常胃组织中无1例阳性表达；两者相比差异有显著性（Plt;0.01）eIF4E阳性表达与患者年龄、性别以及肿瘤分化程度均无明显相关性（Pgt;0.05），而与肿瘤浸润深度、淋巴结转移以及TNM分期有关（Plt;0.05）, 见表1。 　　2.2 胃癌组织中cyclin D1表达 　　cyclin D1阳性染色主要见于胃癌细胞的胞核。在检测的91例胃癌中cyclin D1阳性表达者达77例，阳性表达率为84.6%；而30例正常胃粘膜组织中均未见阳性表达；二者差异有显著性（Plt;0.01）。cyclin D1阳性表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移以及TNM分期有关（Plt;0.05），而与患者年龄、性别以及肿瘤分化程度均无明显相关性（Pgt;0.05），见表1。 　　2.3 胃癌组织中eIF4E与cyclin