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第8章 分子发光分析法 8-1 光致发光及影响荧光发射因素 8-2 荧光分析法 8-3 磷光分析法 8-4 化学发光分析法 8-5 光化学传感器 第8章 分子发光分析法 （Molecular Luminescence Analysis ） 分子吸收能量，电子由基态进入激发态，当电子由激发态 返回基态时发射光谱 M+能量→M ＊→M+热量 →M+ h ′+热量 光子 —— 光致发光 M+ h →M ＊ 阴极射线—— 阴极射线发光 荧光 磷光 X 射线—— X 射线发光 F P -7 -9 -3 热—— 白炽发光 寿命10 —10 s 10 —10s 超声波—— 声纳发光 离子流—— 离子发光 化学反应能——化学发光 M+化学能→M ＊ 8.1 概论 8.1.1 分子发光的类型 1.按激发的模式分类： ①分子吸收光能被激发，所产生的发光为光致发光，如分 子荧光和磷光。 ②分子由化学反应的化学能或由生物体 （经由体内的化学 反应）释放出来的能量所激发，其发光分别称为化学发光 或生物发光。 2. 以分子发光作为检测手段的分析方法称为分子发光分析 法，本章所介绍的包括荧光分析法、磷光分析法和化学发 光分析法。 8.1.2 分子发光分析法的特点 灵敏度高：较吸收光度法一般要高2 ~ 3个数量级。 选择性比较高：物质对光的吸收具有普遍性，但吸光后并 非都有发光现象。即便都有发光现象，但在吸收波长和发 射波长方面不尽相同，这样就有可能通过调节激发波长和 发射波长来达到选择性测定的目的。 样品量小，操作简便，工作曲线的动态线性范围宽。 发光检测的高灵敏度，以及发光光谱、发光强度、发光寿 命等各种发光特性对所研究体系的局部环境因素的敏感性 ，因此，发光分析法在光学分子传感器以及在生物医学、 药学和环境科学等方面的应用更显示了它的优越性。 8.2 分子荧光与磷光光谱分析法 8.1.1 分子发光的类型 按激发的模式分类： 分子吸收光能被激发，所产生的发光为光致发光，如分子 荧光和磷光。 分子由化学反应的化学能或由生物体 （经由体内的化学反 应）释放出来的能量所激发，其发光分别称为化学发光或 生物发光。  以分子发光作为检测手段的分析方法称为分子发光分析法 ，本章所介绍的包括荧光分析法、磷光分析法和化学发光 分析法。 8.2 分子荧光与磷光光谱分析法 8.2.1 基本原理 1. 分子能级与跃迁 分子能级比原子能级复杂； 在每个电子能级上，都存在振动、转动能级； 基态(S )→激发态(S 、S 、激发态振动能级) ：吸收特定频率 0 1 2 的辐射；量子化；跃迁一次到位； 激发态→基态：多种途径和方式(见能级图) ；速度最快、激 发态寿命最短的途径占优势； 第一、第二、…电子激发单重态S 、S … ； 1 2 第一、第二、…电子激发三重态T1 、T2 … ； 2.电子激发态的多重度 电子激发态的多重度：M=2S+ 1 S为电子自旋量子数的代数和(0或1) ； 平行自旋比成对自旋稳定(洪特规则) ，三重态能级比相应单 重态能级低； 大多数有机分子的基态处于单重态；