养殖克氏原螯虾体内白斑综合征病毒的绝对定量分析.PDFVIP

第 40 卷 第 3 期 水 产 学 报 Vol. 40, No. 3 2016 年 3 月 JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA Mar., 2016 文章编号: 1000–0615(2016)03–0318–08 DOI: 10.11964/jfc.20150309752 养殖克氏原螯虾体内白斑综合征病毒的绝对定量分析 1, 2 1 1, 2 * 兰江风 ， 代云佳 ， 林 蠡 (1. 华中农业大学水产学院，湖北 武汉 430070; 2. 农业部淡水生物繁育重点实验室，湖北 武汉 430070) 摘要：近年来克氏原螯虾的养殖受到WSSV 的威胁，病毒在宿主组织中的绝对定量对于 了解病毒的致病性具有重要意义，但克氏原螯虾组织中WSSV 的绝对定量分布还有待研 究。实验调查了湖北省5个主养区克氏原螯虾WSSV 的感染率，结果表明80% 以上克氏原 螯虾都携带有WSSV 。采用WSSV-VP28 蛋白特异性抗体对克氏原螯虾提取蛋白进行 Western Blot检测，在WSSV-PCR 阳性样品中可检测到VP28特异性条带，在WSSV-PCR 阴 性样品中没有检测到相应条带。采用实验室建立的WSSV 绝对定量PCR 方法，对携带病 毒的克氏原螯虾6个组织(鳃、胃、肠、血淋巴细胞、肝胰腺和心脏)进行检测。结果表 8 7 明，在鳃、胃和肠可检测到较多病毒量( 约10 拷贝/mg) ，其次是血淋巴细胞 (10 6 3 拷贝/mg) 、肝胰腺(10 拷贝/mg) ，在心脏中病毒的含量最低(10 拷贝/mg) ，表明病毒的复 制存在组织特异性。结果显示WSSV 主要存在于消化系统中，预示着克氏原螯虾可能主 要在摄食过程中感染WSSV; 不同地区克氏原螯虾组织病毒携带量表现出一定差异，预示 着WSSV 感染可能受到环境因素的影响。 关键词: 克氏原螯虾；白斑综合征病毒；感染率；组织分布 中图分类号: Q 786 ；S 917 文献标志码: A 克氏原螯虾(Procambarus clarkii )俗称小龙 氏原螯虾养殖也出现了疾病流行。比如，2014年 虾，属于节肢动物门、甲壳纲、十足目、螯虾 湖北潜江市发病水面有十多万亩，给广大农户 科、原螯虾属。由于其味道鲜美，深受国内外 造成了巨大的经济损失。关于湖北克氏原螯虾 消费者喜爱，已成为世界性经济虾类。克氏原 患病的病原，目前还没有统一结论。陈昌福等[1] 螯虾原产于墨西哥北部和美国南部，1918年首次 研究认为，病原可能是细菌和病毒的混合物， 被引进到日本，随后约在20世纪30年代末期由日 之后鉴定了副溶血弧菌( Vibrio p