中等剂量X线对MOLT-4细胞凋亡期特异性影响.pdfVIP

华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 前 言 [1] 肿瘤被认为是细胞损伤引起的细胞周期异常的疾病 。细胞的损伤分为直接损伤 和间接损伤，电离辐射如放射线通过作用于细胞DNA ，可直接导致细胞损伤。 放射线主要是通过导致细胞 DNA 双链断裂(DNA double ．strand break ， DSB ）,DNA 双链断裂(doublestrand breaks，DSBs)是真核基因组后果最严重的损 [2] 伤类型之一 。DSBs可在正常代谢过程或环境因素致病理状态下生成．DNA损伤修 复(DNA damage repair，DDR)是维护基因组完整性的关键，哺乳动物细胞DSBs有 2 种主要修复途径：一是，非同源末端连接(nonhomologous end-joining，NHEJ) ； 二 是，保守的无错误的同源重组(homologous recombination，HR) ．选择何种修复方式 主要取决于受损时的细胞周期．HR要求有同源DNA模板，常发生在姊妹染色体已形 成的晚S期和G 期；NHEJ则主要对G 期和早S期的DDR负责．修复的各步骤需多种蛋 2 1 [3] 白质及其复合体与修复酶的共同参与， 以确保修复的高效性和保真性 。 肿瘤患者在外科手术治疗后，会接受放射治疗，尤其是那些尚未发生转移的肿 瘤患者，但疗效差别却很大[4,5] 。因此研究肿瘤细胞在射线打击下的死亡规律对临床 肿瘤的治疗有重要意义。 DNA 是公认的辐射作用靶分子, 辐射的生物效应是通过对细胞DNA 损伤表现 [6] 的 。传统的观点认为，ATM 主要应对DNA双链断裂，而ATR则主要应对DNA单链 断裂，但是后来的研究发现ATR在双链断裂发生的时候也被激活。目前普遍认为， ATM主要被离子辐射或者某些药物造成的双链断裂所激活[7] 。ATM 最主要的功能区 为磷脂酰肌醇 32 激酶(phosphatidylinositol 32kinase , PI3 K) ,它位于ATM蛋白C 末 端。此功能区主要参与细胞周期的调控,DNA 损伤识别和修复[8] 。DNA损伤反应(DNA damage response)防御系统．细胞内称为“Sensor” 的感应器分子(ATM、ATR)能迅速识 别损伤，再由“Signaller”(Chk1 ，Chk2)介导级联反应，启动下游多种“effectors”分子 (p2l ，Cdc25A，Cdc25C)，激活细胞周期检查点(cell cyclecheckpoint)，引发周期阻滞， 提供时间修复损伤；如损伤不能修复或不能正确修复，则启动凋亡和非凋亡性死亡 [2] (apoptosis and non-apoptotic death)程序，清除有损伤或病变倾向细胞 。 3 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 细胞受到离子辐射使DNA损伤，或者被某些引起DNA双链断裂的化合物处理，激 活ATM磷酸化Chk2 的Thr68(也可能引起Chkl的Ser317 和Ser345 位点磷酸化) ，进而磷 酸化Cdc25A，使后者产生和 14-3-3 蛋白结合的位点，并在 14-3-3 蛋白的作用下，从 核内转运出来，泛素化后被蛋白酶体降解[10] 。Cdk/Cyclin复合物直接决定细胞周期进 程DNA发生损伤后，ATM ，ATR-Chk 1 ／Chk2-Cdc25A ／B ／C通路的成员相继被激活