心脏毒性生物标记物的研究进展综述.docVIP

　　心脏毒性生物标记物的研究进展综述 　　随着药物研究的不断深入，药物的毒性作用评价成为药物安全性评价和二次开发过程中的重要环节之一，一直受到人们的广泛关注。其中心脏毒性由于发病急、危害大、恢复困难尤被重视。目前，很多药物在临床应用和药物二次开发过程中都因心脏毒性作用而受到了极大的限制，但现有的早期心脏毒性评价指标如乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）以及门冬氨酸氨基转移酶（AST）等均在灵敏度和特异性等方面有一定的缺陷[1].如 CK-MB 并非为心脏所特有，它在人体骨骼中也有少量存在。在骨骼肌损伤时CK-MB 也会出现异常升高，而且患者的血清CK-MB 的活性在 2~4 d 内就会恢复至正常水平[2].因此，亟需寻找一种快速、有效的分析方法用于心脏毒性的预测评价，以有效地降低药物研发成本，也可对上市药物的毒副反应进行早期预防和监测。 　　随着系统生物学的快速发展，作为系统生物学分支的基因组学、转录组学、蛋白质组学以及代谢组学在药物毒性评价中的应用也日益增多。本文将以系统生物学中的组学技术为基础，对文献报道的基因类、蛋白类以及代谢小分子类心脏毒性生物标记物的研究进展加以综述，旨在为心脏毒性的早期预测评价新方法的建立提供理论支持，并为后续的整体评价提供依据。 　　1 基因类心脏毒性生物标记物 　　基因组学和转录组学的研究在药物毒理学领域的逐步深入，可更全面研究药物的毒理机制，为寻找新的生物标志物以及建立起更加灵敏高效的安全性评价方法提供了新的技术手段与平台。目前，毒理基因组学方法已应用于基因组的生物标志物的发现与识别，生物标志物可以用于预测和评价靶器官毒性。有研究发现微小核糖核酸在急性心肌梗死（AMI）后血浆中的浓度有显着变化，有可能作为心肌损伤早期诊断的标志物[3].microRNA（miRNA）是一类由 17~25 个核苷酸组成的非编码 RNA 分子，通过与 mRNA 的3prime;-UTR 特异性结合，在转录后水平发挥调控作用，可以抑制 mRNA 的翻译或可诱导之降解。miRNA广泛参与了生物学的过程，通过靶向结合基因中与成熟 miRNA 互补的序列，调控发育、细胞分化、增殖和凋亡等生命体的生理和病理过程[3].有研究表明某些 miRNA 的变化可以反映 AMI 患者的心肌损伤情况[4].miRNAs 可以在血浆、血清、唾液、尿液等多种体液中存在，其中血浆中的 miRNA 主要以两种形式存在，80%以非囊泡形式存在，与脂质的载体相结合，20%以囊泡形式存在。miRNA 种类有很多，其中 miR-1、miR-133、miR-499 在心肌中富含。I 模型实验中发现了miR-1、miR-133a、miR-133b 在 AMI 后发生动态变化。在围术期心梗的研究中，实验结果表明 miRNA特别是miR-499在术后6 h即可诊断冠状动脉搭桥手术后的心肌梗死，敏感性较高，特异度最高，优于蛋白类标记物[4].Gidl?f 等[6]在研究猪缺血再灌注模型中发现，miR-133a 在缺血后 30 min 开始增高，2h 后达到峰值。大量的相关研究表明在某些病理情况下，miRNA 的变化可以反映组织的损伤，因此它们可以作为心脏疾病的标志物。 　　2 蛋白类心脏毒性生物标记物 　　蛋白质组学作为后基因时代研究的一个重要内容，是目前生命科学研究领域的热点，已经成为寻找疾病生物标记物和药物靶标最有效的方法之一[7].国内外学者利用蛋白组学技术在寻找心脏毒性标记物方面做了大量研究，发现了一些具有潜在价值的心肌损伤的生物标记物。 　　2.1 肌钙蛋白 　　目前，血清肌钙蛋白已成为心肌损伤早期诊断的主要标记物之一[8].心肌肌钙蛋白不仅是诊断AMI 的重要标志物，也是独立于心电图之外可用于判断梗死灶范围大小及预后的重要血清学指标[9].肌钙蛋白又称肌原蛋白（troponin），是心肌细胞内肌纤维上的一种调节蛋白。肌钙蛋白由3 个亚基（cTnT、cTnI、cTnC）组成。心肌中主要有 cTnT 和 cTnI 两种亚型，由于其灵敏度高，特异性强，被认为是目前最好的心肌损伤标记物。 　　对分子质量为 3.7104,是钙离子结合亚单位，具有很高的器官特异性。它在心肌细胞内分为两个部分，其中94%与细肌丝结合，6%游离在细胞质中。当心肌细胞膜处于完整状态时，cTnT 不能透过细胞膜进入血循环，因此正常血清中几乎检测不到。但当心肌细胞受损，细胞膜结构受到破坏时，大量的cTnT 弥散进入细胞间质，出现在外周血中，使血中浓度升高。一般在心肌损伤后3~6h 出现增高，最高值在14~20h,在血中可持续5~7 d[8,9].由于cTnT具有高度的特异性和灵敏度，因此cTnT 浓度不受年龄、性别、心肌损伤部位及溶栓药物种类等的影响[10