6、朱振宇-荧光定量PCR技术在临床检测中的应用(中山大学).pdfVIP

荧光定量PCR技术在 临床诊断中的应用 中山大学 临床检验标准化研究中心主任 中山大学中山医学院生物化学教研室 教授 朱振宇 医学博士、教授、博士生导师 Tel020 PCR 发展简史 PCR (Polymerase Chain Reaction) 1983 Cetus 公司的Kary Mullis于12月16 日第一次成功 实验发明了PCR 1985 关于PCR 的文章首次由Kary Mullis及其同事等人 在《Science》上发表 1989 12月《Science》杂志将PCR和它所使用的Taq DNA聚合酶命名为第一个“年度分子” 。 1993 Kary Mullis，Nobel Prize in Chemistry 1995 Perkin Elmer 公司研制出荧光定量PCR技术 九十年代中期PCR临床应用在国内全面展开 1998年 荧光定量PCR技术开始在中国应用 于临床检测 PCR循环 PCR循环次数与DNA产量关系 循环次数 DNA 的链数 1 21 2 2 22 4 3 23 8 10 210 1024 20 220 1,048,576 30 230 1,073,741,824 10亿 PCR特点：高效扩增、忠实复制 PCR反应的特点 • 灵敏度高 • 快捷 • 简便 • 对样品纯度要求低 • 可以相对定量 FQ-PCR Ct值的意义 Ct值与重复性 Ct值与浓度 同一样本在相同条件下同时进行96次 不同的模板达到荧光域值时的Ct 扩增 值不同 荧光定量PCR的临床应用 感染性疾病的诊断 感染性疾病的诊断 母婴传播的控制与观察 母婴传播的控制与观察 遗传疾病的诊断 遗传疾病的诊断 肿瘤的诊断 肿瘤的诊断 法医学鉴定 法医学鉴定 早期诊断 （超早期诊断） 早期诊断 （超早期诊断） 病情评估和预后判断 病情评估和预后判断 抗病毒药物疗效的观察、指导 抗病毒药物疗效的观察、指导 新药验证 新药验证 临床应用 一 感染性疾病 1. 病原体含量与病情之间的关系 2. 病原体含量与用药之间的关系 3. 药物及疗法的研究与开