零模波导原理制备及其在单分子荧光检测中的应用-生物技术进展.PDFVIP

生物技术进展 ２０１５年　 第５卷　 第１期　 １０~２１ 进展评述 Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　 ＩＳＳＮ２０９５￣２３４１ Ｒｅｖｉｅｗｓ 零模波导原理、制备及其在单分子荧光检测中的应用 １ꎬ３ １ꎬ３ ２ꎬ３ １ꎬ３ １ꎬ３ 魏清泉 ꎬ　 李运涛 ꎬ　 任鲁风 ꎬ　 周晓光 ꎬ　 俞育德 １.中国科学院半导体研究所ꎬ集成光电子学国家联合重点实验室ꎬ北京 １０００８３ꎻ ２.中国科学院北京基因组研究所ꎬＤＮＡ序列测定技术研究开发中心ꎬ北京 １０００２９ꎻ － ３.中国科学院半导体研究所/ 中国科学院北京基因组研究所 生物信息获取与传感技术联合实验室ꎬ北京 １０００８３ 摘　 要: 单分子荧光检测作为一种能够表征分子个体性质及行为的分析方法ꎬ有助于揭示利用传统荧光检测方法无法 得到的信息ꎬ在近年来受到人们的广泛关注ꎮ 利用传统光学检测设备进行单分子荧光检测时ꎬ由于受到衍射极限的限 制ꎬ同时为了保证在观测体积内只有单个荧光分子ꎬ仅能采用无限稀释溶液的方法实现单分子荧光检测ꎮ 虽然这种方法 可以满足单分子检测的要求ꎬ但是由于大部分酶分子正常工作时底物的生理浓度都非常高ꎬ底物浓度的大幅度降低会对 酶分子的反应机制等方面造成影响ꎮ 零模波导作为一种新型的单分子检测器件ꎬ通过纳米微孔结构突破了光学衍射极 －２１ 限的限制将观测体积降至仄升量级(１０ Ｌ)ꎬ使得在生理浓度范围内检测单分子荧光成为可能ꎬ在单分子荧光检测领域 得到了广泛应用ꎮ 因此ꎬ就零模波导的原理、制备工艺及其在单分子ＤＮＡ 测序、生物膜、生物大分子之间的相互作用及 单分子反应动力学方面的具体应用进行综述ꎮ 关键词: 零模波导ꎻ单分子ꎻ纳米微结构器件 ＤＯＩ:１０.３９６９/ｊ.ｉｓｓｎ.２０９５￣２３４１.２０１５.０１.０２ Ｚｅｒｏ￣Ｍｏｄｅ Ｗａｖｅｇｕｉｄｅｓ: ｔｈｅ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅꎬ Ｆａｂｒｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｉｎ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｉｎｇｌｅ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ　 １ꎬ３ １ꎬ３ ２ꎬ３ １ꎬ３ １ꎬ３ ＷＥＩ Ｑｉｎｇ￣ｑｕａｎ ꎬＬＩ Ｙｕｎ￣ｔａｏ ꎬＲＥＮ Ｌｕ￣ｆｅｎｇ ꎬＺＨＯＵ Ｘｉａｏ￣ｇｕａｎｇ ꎬＹＵ Ｙｕ￣ｄｅ １.Ｓｔａｔｅ ｋｅｙ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ ＯｐｔｏｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃｓꎬＩｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ ＳｅｍｉｃｏｎｄｕｃｔｏｒｓꎬＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙ ｏｆ ＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＢｅｉｊｉｎｇ １０００８３ꎬＣｈｉｎａꎻ ２.Ｔｈｅ ＤＮＡ Ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｒ＆Ｄ ｃｅｎｔｅｒꎬＢｅｉｊｉｎｇ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ ＧｅｎｏｍｉｃｓꎬＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙ ｏｆ ＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＢｅｉｊｉｎｇ １０００２９ꎬＣｈｉｎａꎻ ３.Ｔｈｅ Ｊｏｉｎｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ Ｓｅｎｓｉｎｇ ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙꎬＩｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ ＳｅｍｉｃｏｎｄｕｃｔｏｒｓꎬＢｅｉｊｉｎｇ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ ＧｅｎｏｍｉｃｓꎬＣｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ ＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＢｅｉｊｉｎｇ １０００８３ꎬＣｈｉｎａ Ａｂｓｔｒ