第24届国际生物学奥林匹克竞赛试题理论Ⅰ-1.pdfVIP

2015 年第50 卷第 10 期 54 生物学通报 第 24 届国际生物学奥林匹克竞赛试题 理论 1 -1 范六民 1 佟向军 1 许崇任 t 张雁云 2 (l北京大学生命科学学院 北京 lC刷71 2 北京师范大学生命科学学院 北京 100875 ) 中国图书分类号:G634. 915 文献标识码:E 问题 3 泛素化是一种翻译后的蛋白修饰， 问题 1 以氯霉素乙酷转移酶(CAT)为报告 是在放线菌门的一些物种中发现的，指短的泛素 基因，利用报告基因实验对一种新的基因启动子 蛋白 (Pup) 在泛素连接酶的作用下连接到目标蛋 的特征进行了分析。 线性的 DNA 双链片段包含全 部 4 个启动子元件或只选择假定的启动子元件 白的赖氨酸侧链上。 (白色框区，编号 卜的，下游连接 CAT 报告基因。 日 t~蛋白 / -飞 / 广 工.l1...J垒， ι一--♀红 / _G 泛ltiilllWì / _J.炉F 将不同 DNA 片段( 1- V ) 的构建体分别进行 ML J dds 一飞;;tAQJ/ju 细胞转染，然后测定 CAT 的活性。 Pup 1 {J][I][I]囚一 为了检测蛋白 X 是否发生泛素化，将纯化得到 11 --mrn囚一 立 的蛋白 X 与泛素及泛素连接酶孵育过夜;添加膜蛋 HlfF42-f 白酶，并通过质谱仪测得经水解获得肤段的分子量 IV --[D-一-ffi- ð (红色)。 注:膜蛋白酶(通过添加分子量为 18.02 Da 的水) 在临近赖氨酸或精氨酸的位置水解蛋白，对 V 一OJill一 I IV V 照组实验除未添加泛素外，其他流程与实验组相同 (黑色)。注意泛素的片段不在检测范围内。 其他 DNA 构建体启动子的活性并未检测。 a --[D[D口〉一一 081 5 8 对照组 b O:::JITJ-一日于一 ~: ~ l叮 C 一一O:J口3囚一 ~;J ↑↑↑5 ~ ^^ d m囚一 2美 W 指出下面的论述正确还是错误: Z苓 06 A.构建体 a 是一个比构建体 I 更强的启动子 B. 构建体a 是一个比构建体b 更强的启动子 C.构建体 c 是一个比构建体b 更强的启动子