三疣梭子蟹脂多糖-β-1葡聚糖结合蛋白基因的克隆及表达模式分析.pdfVIP

动 物 学 研 究 2010，Dec. 31(6): 587−594 CN 53-1040/Q ISSN 0254-5853 Zoological Research DOI ：10.3724/SP.J.1141.2010.06587 三疣梭子蟹脂多糖-β-1,3-葡聚糖结合蛋白 基因的克隆及表达模式分析 * 张 樱, 金 珊 , 赵青松, 王国良, 余 开, 王春琳 (宁波大学 生命科学与生物工程学院教育部应用海洋生物重点实验室, 浙江 宁波 315211) 摘要：脂多糖-β-1, 3-葡聚糖结合蛋白(LGBP)作为一种模式识别受体在甲壳动物的先天免疫中占有重要地位。 利用 SMART RACE 技术, 从三疣梭子蟹 (Portunus trituberculatus) 血细胞中克隆得到一条 LGBP 基因。该基因 cDNA 序列全长为 1 378 bp, 包括 1 095 bp 的开放阅读框(ORF), 共编码 365 个氨基酸, 在基因的 5端还含有 138 bp 的非编码区(UTR), 3端含有 144 bp 的UTR 。预测的成熟肽相对分子质量为39 825.24 k, 等电点为 4.49 。同时, 用 生物信息学方法对该基因的序列和二级结构进行了初步分析。RT-PCR 结果显示：LGBP 基因在被检测的组织, 包 括血细胞、肝胰腺、心脏、鳃和肌肉中都有表达。用金黄色葡萄球菌 (Staphyloccocus aureus) 和溶藻弧菌 ( Vibrio alginolyticus) 刺激三疣梭子蟹后, 发现在实验 48 h 内, 混合细菌刺激组血细胞中 LGBP 基因的表达量明显高于生 理盐水对照组, 推测该基因在抵抗细菌感染的免疫过程中发挥着积极的作用。 关键词：三疣梭子蟹; LGBP; SMART RACE; RT-PCR 中图分类号：Q78; Q959.223.63 文献标志码：A 文章编号：0254-5853-(2010)06-0587-08 Cloning and expression pattern analysis of a lipopolysaccharide -and β-1,3-glucan-binding protein in Portunus trituberculatus * ZHANG Ying, JIN Shan , ZHAO Qing-Song, WANG Guo-Liang, YU Kai, WANG Chun-Lin (Faculty of Life Science and Biotechnology of Ningbo University, Key Laboratory of Applied Marine Biological by the Ministry of Education , Ningbo 315211, China) Abstract: The lipopolysaccharide -and β-1,3-glucan-binding protein (LGBP) is a pattern recognition receptor, which is fundamental for the innate immune re