甘露醇、尼莫地平与激素合用对家兔急性脑缺血后NO、SOD和MDA的影响.pdfVIP

内蒙古医学院硕士研究生学位论文(2008年) 甘露醇、尼莫地平与激素合用对家兔急性脑缺血后 No、SoD和MDA的影响 随着生活方式的改变，社会压力的增加和人口老龄化的加剧，脑血管病患病率和死 亡率在逐年上升。在我国，脑血管病已是第三位死亡原因，其中缺血性脑血管病占56．6 —80％，致残率占第一位n】，缺血性脑血管病已成为威胁人类健康的主要疾病，给家庭和 社会带来沉重的负担。因此对缺血性脑血管病的治疗显得尤为重要，其主要治疗手段是 溶栓和神经保护。但溶栓治疗因受时间窗和严重的出血并发症及医疗条件的限制，只有 极少数患者能接受该疗法，有作者报道，即使在美国也仅有不到3％的卒中患者能获得 溶栓治疗的机会。因此神经保护治疗显得格外重要，它能干预缺血半暗带的病理生理过 程，阻断缺血的级联反应，减轻缺血再灌注损伤，延长治疗时间窗，增强神经细胞对缺血 的耐受，防止神经细胞死亡，已成为目前缺血性卒中治疗的研究热点之一[2】o目前一些 新研发的神经保护剂虽然在动物实验中有神经保护作用，但在临床实践中并未见到明显 疗效[3】，而且价格非常昂贵，不适合我国国情。而甘露醇、尼莫地平和地塞米松这些经典 老药无论在动物实验和临床实践中都有很好的神经保护作用，价格低廉。目前的研究都 局限在这三种药单独使用或两种药联合使用治疗脑缺血，证明他们都有良好的神经保护 作用，而且两种药联合比单独使用一种药疗效好，但还未见到这三种药联合使用治疗缺 血性脑血管病的文献报道。从理论上讲，这三种药的神经保护机制和作用环节是不同 的，因此这三种药联合使用可以相互协同、相得益彰，应该具有更好的神经保护作用。本 研究旨在进一步探讨这三种药联合使用治疗缺血性脑血管病的神经保护作用以及它们 的用药时机，以指导临床治疗。这在当前医疗费用高，老百姓看病难，看病贵的背景下更 具有良好的现实意义和推广价值o 1．材料和方法 1．1材料 1．1．1动物和分组 将健康家兔42只，雌雄不分，重量在2．0--2．5公斤之间(动物由内蒙古医学院实验动 物中心提供)，随机分成七个组，即假手术组(A组)；缺血对照组(B组)；缺血用药组，缺血用 药组又分为缺血l小时用药组(C组)；缺血3小时用药组(D组)；缺血6小时用药组(E 宣鐾直匡堂堕塑±婴塞生堂丝銮!塑璺至2 组)；缺血12小时用药组(F组)；缺血24小时用药组(G组)，每组六只，作好标记o 1．1．2实验主要器材，药品和试剂： 有限公司)，20％氨基甲酸乙酯(内蒙古医学院病理生理教研室提供)，冰醋酸(分析纯级 内蒙古医学院病理生理教研室提供) 批号o 主要实验器械：721分光光度仪(上海第三分析仪器厂)恒温水浴箱台式离心机微 量式移液器台称天平 1．2方法 1．2．1．造模：将家兔称重后用20％氨基甲酸乙酯按每公斤体重5毫升由耳缘静脉 注入麻醉后，仰卧位固定兔台上，脱毛，消毒，取颈正中切口，逐层切开，找到一侧颈动脉 鞘，分离颈内动脉，A组只分离不结扎，H组结扎一侧颈内动脉，缝合切口，无菌敷料 包扎，造模完毕[4】，整个手术过程严格无菌操作。 造摸成功的标准：通过观察造摸后家兔的精神，意识状态，饮食，二便，肌力，肌张力， 和死亡情况，来判断是否有神经功能缺损【5]o 1．2．2用药：A组和B组给予等量生理盐水，耳缘静脉注射oG-G组分别于结扎颈 地平1．35删l【g【4l。 1．2。3采血：统一由结扎侧耳中央动脉采血3毫升，A组和B组分别于造摸后2，4， 7，13，25小时采血，咖组分别于给药后一小时采血o 1．2．4离心冻存：采血后静置10分钟后，4000转／分离心10分钟，取上清液于一 20℃冰箱冻存待测o 1．3检测方法和原理【4】：试剂盒统一由南京建成生物工程研究所提供o No采用硝酸还原酶法：No化学性质活跃，在体内代谢很快转化成N|听和NⅨ， N呸又很快转化为N|呀，本法利用硝酸还原酶特异性将N0f还原为N呀，通过显色深 浅测定其浓度高低。 凼苤直匡堂暄亟±堑塞生堂焦迨塞(2QQ墨生1 SOD采用黄嘌呤氧化酶法，通过黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子自由基 (02一．)，后者氧化羟胺形成亚硝酸盐，在显色剂的作用下呈现紫红色，用分光光度仪 测定其吸光度。当被测样品中含有SOD时，则对超氧阴离子自由基(02一)有专一性 的抑制作用，使形成