奶牛乳腺组织体外培养体系的建立及MET对其酪蛋白α-%2cs1-基因表达的影响.pdfVIP

2(1114fp浙L【人学坝『：q-他|^卫 图表一览表 图l激素调控乳腺乳蛋白分泌途径(实线为促进，虚线为抑制)………，．16 图2旋转培养奶牛乳腺组织不同时问台盼蓝染色图片………………… 1E 图3旋转培养奶牛乳腺组织活力变化…………………………………… ……26 …．．．26 图4旋转培养奶牛乳腺组织不同时间基因组DNA裂解的变化……… 图5贴壁培养奶牛乳腺组织图片………………………………………… ……27 图6贴壁培养奶牛乳腺组织活力的变化………………………………… ……28 图7贴壁培养奶牛乳腺组织不同时间基因组DNA裂解的变化……………28 ．．，．．34 图8不同引物浓度对酪蛋白A。IPCR扩增效率的影响…………………． 图9不同引物浓度对GAPDHPCR扩增效率的影响…………………………35 ……35 图10不同MGCLz浓度对酪蛋白A。】PCR扩增效率的影响………………………………一 图11不同MGCL2浓度对GAPDHPCR扩增效率的影响……………… ……35 图12酪蛋白A。1循环数对平台期影响…………………………………………36 图13 GAPDH基因循环数对平台期影响…………………………………．．……36 图14PCR产物凝胶电脉分析……………………………………………………37 图17蛋氨酸对奶牛乳腺组织酪蛋白A。。基因表达的影响……………… ．．．．．．45 表l奶牛不同日粮限制性氨基酸………………………………………… ……17 表2奶牛乳腺酪蛋白A sICDNAPCR扩增产物序列分析结果…………．……37 表3奶牛乳腺GAPDH PRC产物序列分析结果…………………………… …一38 型!型坚堑塑堕丝堡兰——一 1．前言 1．1引言 奶牛业在当前世界畜牧业生产中占有重要地位，发展奶牛业对于缓解人畜争 粮矛盾、充分利用非常规饲料资源、保护生态环境及农业可持续发展等方面都起 着决定性的作用。同时，发展奶牛业也是调整优化畜牧结构的重要内容，是畜牧 业发展新的增长点，对促进国民经济的增长和改善人民生活水平具有重要的意 义。改革开放以来，尤其是近几年随着“学生奶”计划的启动，我国的奶牛业 生产无论在数量上还是在质量上都得到了飞跃式的发展。奶牛的饲养量由改革开 1400万吨(王晓方，2003)。但与此同时，我国奶牛业的发展也存在着很多问 题，如奶牛品种单一、奶牛平均单产比较低、奶中乳蛋白含量低及乳品安全等方 面。就奶的营养方面，最突出的问题之一是乳蛋白含量过低。 乳蛋白率过低的原因主要是由于长期以来奶牛育种工作过分强调产奶量和 乳脂率两项生产性能指标，而忽视TSL蛋白指标的选育，因此奶牛乳蛋白浓度始 终较低，而且随着奶牛单产水平的不断提高，这一问题更加突出。近些年研究发 现，牛奶中含有大量的高度饱和脂肪酸助长了胆固醇的循环水平，增加了心血管 疾病的发生率，这使人们的消费观念逐渐由高脂乳向低脂乳方向发生转变，目前 世界很多国家低脂乳销售比例均在逐年增加。同时人们也发现，乳蛋白除给新生 动物和人类提供高营养价值的蛋白质、氨基酸外，某些乳蛋白中的免疫成分及其 消化过程中产生的肽类活性物质还具有特定的生理功能，因此乳蛋白中活性物 质，尤其是消化过程中产生的特定功能肽类已成目前乳制品研究领域中的热点问 题。当今世界许多国家，牛奶价格体系中都已经把乳蛋白的价值放在首位．有的 国家乳蛋白和乳脂肪比价甚至达1．5：l。我国新的巴氏杀菌乳标准(GB5408，l --1999)把乳蛋白(≥2．9％)作为一项主要指标列入荷斯坦牛的乳蛋白浓度约为 2·8％～3．4％(蒋兆春等，2002)。考虑到乳品消费者与生产者对乳成分需求的 变化，提高乳蛋白浓度与产量将