湖北工业大学氨基酸工艺学噬菌体与杂菌污染与防治.pdf

第六章 噬菌体与杂菌污染与防治 目录 • 1 氨基酸发酵中噬菌体 污染与防治 • 2 杂菌的污染与防治 • 3 消毒与灭菌 • 4 发酵设备、管件的渗漏 • 5 发酵培养基灭菌与空气净化 一 氨基酸发酵中 噬菌体污染与防治 • 什么是噬菌体？ • 氨基酸发酵中噬菌体的污染 • 防治噬菌体对氨基酸发酵的污染 • 氨基酸发酵污染噬菌体后的挽救 什么是噬菌体？  噬菌体（phage ）是侵染细菌、放线菌等微生物并使其细胞裂解 死亡的一类病毒  噬菌体个体微小，须用电子显微镜观察  噬菌体无细胞结构，但具有一定的形态结构。其基本形态为蝌 蚪状、微球状和丝状，多数呈蝌蚪形，由头部和尾部两部分组 成 什么是噬菌体？  噬菌体对理化因素的抵抗力比一般细菌的繁殖体强，如能耐受 乙醚、氯仿、乙醇和低温、冷冻等，但对紫外线、X射线等敏 感，易受热变性（60 ～70℃，10 ～15min ）  根据噬菌体与宿主细胞的关系，可将其分为烈性噬菌体和温和 噬菌体  侵染宿主细胞后使细胞裂解的，称为烈性噬菌体，又叫毒性噬 菌体（virulence phage ）  不裂解寄主细胞，并随寄主细胞分裂而传递其DNA的，称温和 噬菌体（temperate phage ），又称为溶原性噬菌体（lysogenic phage ） 什么是噬菌体？  从噬菌体吸附到细菌裂解释放出子代噬菌体的过程称为噬菌 体复制周期，又称溶菌周期或裂解周期 噬菌体的生活史 吸附 侵入 复制 成熟 释放 噬菌体缺乏独立代谢的酶系，不能脱离寄主而自行生长 繁殖；缺乏细胞结构，是非细胞类型。它的生长繁殖包括 吸附、侵入、复制和成熟四个阶段。 什么是噬菌体？ 噬菌体的感染作用有严格的专一性，一种 噬菌体往往只侵染一种细菌或某一株菌。 氨基酸发酵中噬菌体的污染 • 噬菌体污染的异常现象  氨基酸发酵中污染噬菌体，由于污染时间和感染量的不同，以 及噬菌体“毒力”和菌株敏感性的差异，表现症状是不一样的， 一般会出现“二高三低”  pH 高（大于8.0 ）、残糖高  OD低、温度低、产酸低 氨基酸发酵中噬菌体的污染 • 发酵前期污染噬菌体  吸光度开始上升后下降、不升或回降  pH回升；  CO 迅速下降 2  耗糖慢  OD增长缓慢，发酵周期长，提取困难  泡沫大量产生；  发酵液粘度大，甚至呈现粘胶状，可拔丝；  发酵液发红、发灰；  有刺激气味 氨基酸发酵中噬菌体的污染 • 发酵前期污染噬菌体  二级种子营养要求逐渐加多，种龄延长；发酵周期逐罐延长， 产酸缓慢或下降；  送往提取车间的发酵液，发红、发灰、残糖高、有刺激性臭味， 泡沫大、粘度大、过滤困难，收率低 氨基酸发酵中噬菌体的污染 • 发酵前期污染噬菌体（0-12h）  产酸量甚少，或增长极为缓慢，或不产酸  镜检时可发现菌体数量显著减少，菌体不规则  细胞核染色，部分细胞核消失，完整菌体很少  平板检查有噬菌斑；摇瓶检查发酵液清稀 氨基酸发酵中噬菌体的污染 • 发酵后期污染噬菌体  发酵后期污染噬菌体常对产酸影响不大，甚至有时竟有提高产 酸的趋势  提取困难，  后期污染前移，造成更严重的危害 氨基酸发酵中噬菌体的污染 • 噬菌体严重污染的早期预报  当空气中的噬菌体浓度上升到每个平板达10~20PFU/mL