内质网中FKBP23与BiP结合后对BiP的ATPase活性的影响.pdf

第一章 前言 第一章 前言 免蛋白具有两大主要特征：～是存在的广普性和遗传上的保守性，即从低 等生物、植物、动物直至人等高级哺乳动物的体内以及细胞的各亚结构中 均有亲免蛋白存在；二是肽脯氨酰顺反异构酶(PPIase)活性，这种活性能 被与之结合的用于器官移植的免疫抑制剂FK506或环孢菌素A 家族在内质网体中的成员。在生命体中，蛋白质在其生理位置需折叠成具 有J下常生理功能的空间结构才具有活性。Hsp70家族蛋白在生物体内的主 要功能是在蛋白质于细胞内亚细胞结构间转运的过程及其折叠过程中，充 当分子伴侣的角色。 有此特征。mFKBP23c端的EF手模体结构具有Ca”结合活性的特征，改 实验结果表明产生此调节作用的Ca”浓度的转折点在2～3mM之间【“。 目前，关于亲免蛋白结合类免疫抑制剂在器官移植中发挥作用的分子 生物学机制，虽然有一些提法，但是众说不一。我们的课题从内质网体中 蛋白质输送和分泌的方向入手，研究了FKBP23与它的特异性结合蛋白BiP 的相互作用关系，从而为进一步探索这个亲免蛋白的生理功能，全面了解 亲免蛋白结合类免疫抑制剂作用的分子生物学机制提供了一些线索。 以下将简要介绍近年来有关亲免蛋白、蛋白质折叠以及分子伴侣等本 课题相关领域的研究进展和本课题的研究内容与成果。 第一章 前言 第一节 亲免蛋白研究概况 1．1．1 亲免蛋白名称的由来 1．1．1．1免疫抑制剂 力保障。常用的免疫抑制剂有四类：①化学合成细胞毒素类(抗代谢剂和烷 化剂)；②抗生素类；③肾上腺糖皮质激素类：④生物制剂类。目前生物制 剂类免疫抑制剂主要包括环孢菌素A、FK506及雷帕霉素【2】。 环孢菌素A(CyclosporineA，CsA)于1970年从真菌中分离提取，1978 年首次应用于临床肾移植，1983年FDA批准其用于临床器官移植。它是一 种中性、高亲脂性的聚肽，由11个氨基酸组成。它可作用于被激活的淋巴 细胞，阻止淋巴因子基因的转录，从而减少白介素．2的表达，抑制细胞的免 疫反应【3J。环孢菌素A的应用使器官移植的临床实践绝境逢生，它的应用不 仅大大延长了异体实质性器官的存活率，而且对自身免疫性疾病的治疗提供 J。 了乐观的前景i4 肉汤培养基中提取的一种链霉菌属产生的23碳大元环内酯类抗生素，分子 能预防排斥反应，也可以治疗排斥反应。近年的临床应用表明，FK506广泛 应用于各种器官移植。其作用强度是环孢菌素A的100倍，具有很强的免疫 抑制作用，并在控制排斥反应、保护移植功能、提高病人生存率方面有很大 的优越性，同时具有低感染率及对激素无依赖性的特点。FK506可与体内的 亲免蛋白FKBP形成复合物，作用于细胞分化早期，阻断淋巴因子基因的转 录，从而导致胸腺髓质萎缩、成熟胸腺细胞减少【3】。 3， 分子量为914．2，其具有抗真菌、抗炎、抗肿瘤及免疫抑制作用。可通过不同的 细胞因子受体阻断信号传导，阻断T淋巴细胞及其他细胞由G1期至S期的 进程，从而发挥免疫抑制效应。1989年开始将其作为治疗器官移植的排斥反 应的新药进行试用，从目前的临床试验来看，雷帕霉素具有很好的抗排斥作 第一章 前言 用，且与环孢菌素A和FK506等免疫抑制剂有良好的协同作用，是一种疗 效好、低毒、无肾毒性的新型免疫抑制剂。目前该药物的确切机制不十分清 楚，尽管也是通过与FKBP形成复合物来发挥免疫抑制作用，但可以肯定其 作用机制与FK506完全不同引。 1．1．1．2免疫抑制剂在生物体内的天然配基——亲免蛋白 随着上述生物制剂类免疫抑制剂的临床广泛应用以及药理机制研究的 深入，人们发现生物机体内普遍存在着可与这些免疫抑制剂结合的受体蛋白 一类蛋白定名为FKBP(FK506bindingprotein)。后来发现新研制出的雷帕 J。 同的受体蛋白【b 1．1．2亲免蛋白家族 由上述可见，亲免蛋白从大的方向上可以分为两大类：亲环素家族和 FKBP家族。近十年来，随着单克隆抗体、放射性标记及免疫印迹技术等细 胞生物化学技术的发展，人们对亲免蛋白的发现和认识有了很大拓