重组人！#$%在大肠杆菌中的表达及其抗肿瘤作用！.PDFVIP

张海峰等! 重组人)*+#, 在大肠杆菌中的表达及其抗肿瘤作用! 第 期 ·#2 # · 重组人!#$% 在大肠杆菌中的表达及其抗肿瘤作用! 张海峰! 盛伟华! 缪竞诚! 谢宇锋! 李丽娥! 马丽丽! 庄文卓! 杨吉成 （苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室，苏州#$%% ） 中国图书分类号 ’()*+ $* 文献标识码 , 文章编号 $#.%./（*--0 ）-*#-$.$#-. ［摘! 要］! 目的：获取’()*+#, 原核表达产物并研究其活性。方法：用本室构建的含基因重组表达载体-./%+)*+#, 的 大肠杆菌01$! ，经23 热诱导表达和包涵体提取纯化后获取’()*+#, 蛋白；采用4*)56 试剂盒检测’()*+#, 刺激-.78 分泌 )9:+ 的活性及7;; 法检测其对: 细胞杀伤$= 细胞自然杀伤活性；同时用荷瘤小鼠模型检测其体内抗瘤功能。结果：诱 导含重组表达载体-./%+)*+#, 的大肠杆菌01$! 后，蛋白电泳显示出一条相对分子量（!’ ）为 #, %%% 的蛋白条带；#% # ’()*+#, 蛋白体外刺激-.78 后，其分泌)9:+ 的能力与对照组相比提高了, 倍，细胞毒性提高? 倍；同时’()*+#, 蛋白能明显 抑制肿瘤生长和延长荷瘤鼠生存期。结论：获得了有免疫调节功能和抗肿瘤活性的’()*+#, 蛋白，为今后)*+#, 重组产物的研 制和开展肿瘤的生物治疗提供了实验依据。 ［关键词］ ! 白介素#, ；基因表达；免疫调节功能；抗肿瘤活性 123 345637789: ;: ;:=8#=?96 ;@=8A8=B 9C 62!#$% #$% #’()*+,- ，.#/% 0+()#1’ ，23$ 4 5(,-)67+,- ，83/ 91)*+,- ，23 2()/ ，!$ 2()2( ，# :$% 0+,)71; ， 9$% 5()67+,- =+ ’?@A+,@ ;B 6+CC1C’? ’,D !;C+E1CC’? ，!+D(E’C 6;CC+-+ ;B .1F7;1 :,(G+?H(@I ，.1F7;1 #$%% ，67(,’ ［,D7=6;@= ］! EDF3@=8A3 ：;@ @ABCDE F’@GC’H@BDI JKF’JLLD@E F’@BJDE @M )*+#, CEN ’JLJC’I( DBL MOEIBD@EP G3=297 ：.H (JCB+DENOIDE / E;C( 01$! IC’’HDE JKF’JLLD@E QJIB@’ -./%+)*+#, R(DI( RJ’J I@ELB’OIBJN AH OL，CEN AH JKB’CIBDE CEN FO’DMDE DEISOLD@E A@NH ，B(J F’@BJDE @M )*+#, RCL @ABCDEJN ，B(JE B(J MOEIBD@E @M F’@T@BDE )9:+ LJI’JBD@E M’@T -.78 DL BJLBJN AH 4*)56 ，B(J IHB@B@KDBH @M B(J : IJSSL B@ $= IJSSL RCL BJLBJN AH 7;; ，CEN B(J CEBD+BOT@’ MOEIBD@E (, G(G; RCL BJLBJN AH TDIJ BOT@’ T@NJSP ’37H=7 ：6MBJ’ DENOIDE / E;C( 01$! IC’’HDE JKF’JLLD@E QJIB@’ -./%+)*+#, ，B(J F’@BJDE RDB( ’JSCBDQJ T@SJIOSC’ TCLL（!’ ）#, %%% RCL NJBJIBJN ；CMBJ’ LBDTOSC+ BJN AH #% # ’()*+#, F’@BJDE DE QDB’@ ，)9:+ LJI’JBD@E CEN B(J IHB@B@KDBH @M -.78 I@TFC’DE RDB( B(J I@EB’@S ’@OF RCL F’@T@BJN AH , BDTJL CEN ? BDTJL ’JLFJIBDQJSH ，CEN B(J CQJ’CJ LO’QDQCS BDTJ @M TDIJ IC’’HDE BOT@’ RCL @AQD@OLSH F’@S@EJNP I9:@H789: ：;(J ’()*+#, F’@BJDE R(DI( (C