分析化学(仪器分析)第五章分子发光分析法.pptVIP

第五章 分子发光分析法 （Molecular Luminescence Analysis） 分子发光（Molecular Luminescence） 基态分子吸收了一定能量后，跃迁至激发态，当激发态分子以辐射跃迁形式将其能量释放返回基态时，便产生分子发光。 激发模式： 光致发光（荧光，磷光） 热致发光 场致发光 化学发光 §5.1 荧光分析法 一、概述 根据物质的分子荧光光谱进行定性，以荧光强度进行定量 16世纪，人们已经观察到了荧光现象 1852年，Stokes考察了奎宁和叶绿素的荧光，对荧光现象给出了解释 1864年，Stokes提出将荧光作为一种分析方法 1867年，Goppelsroder应用铝－桑色素络合物的荧光测定了铝 1924年，Wawwilous进行了荧光量子产率的测定 1926年，Gavila对荧光寿命进行了测定 荧光分析法的特点 灵敏度高检出限通常比分光光度法低2-4个数量级 选择性好包括激发和发射两个过程，通过前后两次波长的选择，可得到更高的选择性 方法简便快速，试样用量少 对环境因素比较敏感，能产生强荧光的化合物相对较少，使其应用受到一定限制 一、荧光与磷光的产生过程 2.电子激发态的多重性 3.激发态→基态的能量传递途径 非辐射能量传递过程 2、荧光效率及其影响因素 （1）荧光效率 荧光效率用来描述激发态分子发生辐射跃迁返回基态的概率的大小，定义为发荧光的分子数目与激发态分子总数的比值。 荧光效率(φf)＝发荧光的分子数／激发态分子总数 Φf越高，辐射跃迁的概率越大，发射的荧光越强 具有分析应用价值的荧光化合物， φf应在0.1-1之间 （2）荧光与分子结构的关系 物质必须能够吸收紫外-可见光，即分子中必须含有共轭双键这样的强吸收基团，共轭体系越大，π电子的离域性越强，越易被激发而产生荧光。 共轭芳环增大，荧光效率提高，荧光峰向长波方向移动。 萘 φf＝0.29, λem=310nm 蒽 φf＝0.46, λem=400nm b. 分子的刚性平面结构有利于荧光的产生 荧光素， φf接近1 酚酞，没有荧光 刚性平面结构可以减少分子振动和碰撞去活的可能性。 有机配位剂与金属离子形成螯合物后荧光强度增大，也是由于形成了共平面的配合物的原因。 c. 取代基的影响 给电子基团(-OH, -NH2, -NR2, -OR)使共轭体系增大，导致荧光增强。反之， 吸电子基团(-COOH, -NO, -NO2)使荧光减弱。 “重原子效应”--- 随着卤素取代基原子序数的增加，物质的荧光减弱，磷光增强的现象。 分子中由于重原子的存在导致容易发生系间窜跃的效应，产生的原因是原子序数高的重原子的电子自旋和轨道间的相互作用变大，容易发生自旋偶合作用，使S1－T1的体系间窜跃显著增加所致。 （3）环境因素对荧光的影响 a. 溶剂的影响 电子激发态比基态具有更大的极性，溶剂的极性增强，对激发态会产生更大的稳定作用，使荧光波长红移，强度增大。 b. 温度的影响 辐射跃迁的速率不随温度而变，而非辐射跃迁的速率随温度升高而显著增大。温度升高，使得非辐射跃迁概率增大。 T增大， φf减小 c. pH值的影响 含有酸性或碱性取代基的芳香族化合物的荧光性质受pH值的影响大，在不同的pH环境中具有不同的型体，往往表现出不同的荧光性质，同时质子化会对π电子体系产生影响。 pH值的改变可使络合物的组成发生改变或离解，从而使其荧光性质发生改变。 例如：Ga3+与邻二羟基偶氮苯络合物 pH=3~4，组成比为1:1，发荧光 pH=6~7，组成比为1:2，无荧光 d. 表面活性剂的影响 形成有序的胶束微环境，对激发单重态的分子起保护作用，减小非辐射跃迁的概率，提高荧光效率。 e. 溶解氧的荧光熄灭作用 氧分子具有顺磁性（三重态），溶解氧的存在，使激发态单重态分子向三重态的体系间窜跃速率加大，因而会使荧光效率降低。 3、荧光强度与溶液浓度的关系 荧光强度If正比于吸收的辐射强度Ia与荧光量子产率φf 。 If = φf Ia 稀溶液时， If =2.3 ?f I0 ?lc 对于给定物质，当入射光强度I0 和l一定时，上式为： If = K c 即荧光强度与荧光物质的浓度成之正比，但这种线性关系只有在极稀的溶液中，当?lc