变应性鼻炎对小鼠鼻窦黏膜细菌黏附与NF-κB+p65和糖皮质激素受体表达地影响.pdfVIP

山西医科大学顼士学位论文 第一章 小鼠变应性鼻炎模型诱发急性细菌性鼻窦炎研究 前言 其治疗费用等惊人【lJ。尽管已经对鼻窦炎进行了深入的研究，但其确切的发病机制尚未 rhinitis，AR)是鼻一鼻窦炎的重要诱发 完全了解。目前研究提示，变应性鼻炎(allergic 因素之一【21。 vicious cycle)的理论口】认为，鼻窦口黏膜肿胀或机械阻塞时，如同时合并变态反应性炎症 加剧鼻窦炎病理过程，导致鼻窦继发细菌感染。由此可见，鼻变态反应在鼻窦炎的发病中 确实起关键作用。 ThI／Th2失衡，进而造成鼻黏膜以Th2免疫反应为主的变应性炎症反应。变应原激发阶段， e 肥大细胞(mast Fc受体(FcRI)、以及合成并释放的一系列细胞 cell)借助其表面的IgE 因子和炎性介质等启动并“维持”变态反应【5J。病灶局部大量IL．5、GM．CSF等细胞因子 和炎性介质的聚集，使Eos黏膜下浸润，加重变应性炎症反应病理改变。I型变态反应中IgE 胞因子网络的重要组成部分，能客观反映变态反应性炎症的程度。 以多形核中性粒细胞(polymorphonuclear 学改变是鼻黏膜局部细菌感染性疾病的特征之一。致病菌侵入人体后，首先遭遇非特异性 免疫抵抗，其中以细胞吞噬与炎症反应为主，随后产生特异性免疫，两者结合共同消灭致 病菌。PMN是非特异性反应的主要效应细胞之一，具有活跃的变形运动和吞噬功能，在机 体内起着重要的防御功能。细菌产物及感染组织释放的某些化学物质对PMN具有趋化作 用，PMN变形运动穿出毛细血管，吞噬、消化细菌，清除坏死组织碎片。 基于此，我们认为AR时Eos浸润及其释放的一系列细胞因子等与随后的鼻窦细菌黏 附可能为一组事件中密切相关、存在因果关系的两个序列。本实验旨在观察AR小鼠鼻腔 性鼻窦炎的建模方法和发病机制，为临床治疗提供理论依据。 山西医科大学硕士学位论文 材料与方法 1材料 1．1实验动物 研究所。 1．2主要试剂及来源 小鼠IL一5定量ELISA试剂盒，购于上海森雄科技实业有限公司；甲苯胺蓝，购于国药集团 化学试剂有限公司。 1．3细菌 49619， 选用临床上最常见的3型荚膜型肺炎链球菌(Streptococcuspneumoniae)ATCC 购于北京医院临床检验中心细菌室。 1．4主要仪器 厂)，Olympus BX41型显微镜(日本Olympus公司)。 2方法 2．1动物分组 将受试动物随机分为4组：A组(卵清蛋白+肺炎链球菌)：B组(卵清蛋白+生理 2．2小鼠变应性鼻炎模型f61 (O．1mol／L)中。取1．5ml O～8天，A组和B组经腹腔注射混悬液2001al(2099OVA)，完成基础致敏。C组和D组 腹腔注入等量PBS(O．1mol／L)。 其完全吸入后归笼饲养。C组和D组用等量PBS(O．1mol／L)滴鼻。 行为学观察：于每次激发后即刻、0．5h、lh、2h观察小鼠搔鼻动作、喷嚏、鼻溢液 和觅食行为，并按如下评分标准给予评分记录：①鼻痒：轻搔鼻1--2次记1分，抓挠鼻、 液：流至前鼻孔记1分，超过前鼻孔记2分，涕流满面记3分。记录结果以叠加法记总 分，总分5分者，AR动物模型建立成功。 2．3急性细菌感染性鼻窦炎模型I。 选用3型荚膜型肺炎链球菌(ATcC 49619)作为致病菌。细菌冻干粉解冻，于血琼 脂培养皿中培养、传代。接种前将培养获得的细菌溶液悬浮于生理盐水，菌落浊度相当 于McFafland