维生素的作用 维生素是维持人体.pptx

维生素的作用 维生素是维持人体正常生理功能必需的一类天然有机化合物，其主要功用是通过作为辅酶的成分调节代谢。维生素一般在体内不能合成或合成数量较少，不能充分满足机体需要，必须经常由食物来供给。 维生素的种类 维生素的种类很多，可分为脂溶性维生素和水溶性维生素。脂溶性维生素有A、D、E、K等，水溶性维生素有维生素C和B。在这些维生素中，人体比较容易缺乏而在营养上又较重要的维生素有：A、D、 C 、 E、B1、B2、B6、 烟酸。 维生素的检验方法 检验方法 中有紫外可见分光光度法、荧光光度法， 这两种是多种维生素的标准分析方法。灵敏、快速，有较好的选择性。另外，各种色谱法以其高分离效能，在维生素分析方面占有重要的地位。;1、维生素A的测定——三氯化锑光度法 维生素A的测定方法除三氯化锑光度法外，还有紫外分光光度法、荧光法、气相色??法和高效液相色谱法等。 （1）原理 在氯仿溶液中，维生素A及三氯化锑可相互作用，生成蓝色可溶性配合物，其颜色深浅与溶液中所含维生素A的含量成正比。该蓝色物质在一定时间内可用分光光度计测定其吸光度（于620nm波长处有最大吸收峰），其吸光度与维生素A的含量在一定的范围内成正比，故可比色测定。 ;（2）试剂 ① 无水硫酸钠 不吸附维生素A ② 乙酸酐 ③ 无水乙醚 不含过氧化物 ④ 无水乙醇 不含醛类物质 ⑤ 三氯甲烷 不含分解物 ⑥ 250g／L三氯化锑一三氯甲烷溶液 ⑦ 1：1氢氧化钾溶液 （50%） ⑧ 0.5mol／L氢氧化钾溶液 ⑨ 维生素A标准溶液 ⑩ 酚酞指示剂 ;（4）操作步骤 ① 样品处理 根据样品性质，可采用皂化法或研磨法 ② 标准曲线的绘制 准确取一定量的维生素Ａ标准液于４～５个容量瓶中，以三氯甲烷配制标准系列。再取相同数量比色管顺次取１mL三氯甲烷和标准系列使用液１mL，各管加入乙酸酐1滴制成标准比色系列。于620nm波长外，以三氯甲烷调节吸光度至零点，将其标准比色系列按顺序移入光路前，迅速加入９mL三氯化锑－三氯甲烷溶液。于６s内测定吸光度，绘出标准曲线图。 ;皂化法:适用于维生素A含量不高的样品(可减少脂溶性物质的干扰,但费时,维生素A易损失) 1、皂化：称取0.5~5克样品于三角瓶中，加入10mL氢氧化钾及20~40mL乙醇，于电热板上回流30min至皂化完全为止。 2、提取：将皂化瓶内混合物移至分液漏斗，以30mL水洗皂化瓶，洗液并入分液漏斗中。振摇并注意放气，静置分层后，水层放入第二个分液漏斗中。皂化瓶再用约30mL乙醚分两次冲洗，洗液倾入第二个分液漏斗。振摇后，静置分层，水层放入三角瓶中，醚层及第一个分液漏斗合并。重复至水液中无维生素A为止。;3、洗涤：用约30mL水加入第一个分液漏斗中，轻摇，静置片刻，放去水层，加15~20mL0.5mol/L氢氧化钾液于分液漏斗中，轻摇后，弃去下层碱液，除去醚溶性酸皂。再用水洗涤，每次用水约30mL，直至洗涤液及酚酞指示剂呈无色为止。醚层液静置10~20min，小心放出析出的水。 4、浓缩：将醚层液经过无水硫酸钠滤入三角瓶中，再用约25mL乙醚冲洗分液漏斗和硫酸钠2次，洗液并入三角瓶内。置水浴上蒸馏，收回乙醚。直到瓶中剩5mL时取下，用减压抽气法至干，立即加入一定量的三氯甲烷使溶液中维生素A含量在适宜浓度范围内。;研磨法：适用于每克样品维生素A含量大于5~10μg样品的测定（步骤简单，结果准确） 1、研磨：精确称取2~5g样品，放入盛有3~5倍样品质量的无水硫酸钠研钵中，研磨至样品中水分完全被吸收，并均质化。 2、提取：小心地将全部均质化样品移入带盖的三角瓶内，准确加入50~100mL乙醚，紧压盖子，用力振摇2min，使样品中维生素A溶于乙醚中，使其自行澄清（或离心澄清）。 3、浓缩：取澄清乙醚液2~5mL，放入比色管中，在70~80℃水浴上抽气蒸干，立即加入1mL三氯甲烷溶解残渣。;（5）结果计算  X------样品中维生素Ａ的含量，mg/100g（若按国际单位，每国际单位相当于０.3μg维生素Ａ）；  c------由标准曲线上查得样品中含维生素Ａ的含量，μg／mL； m-----样品质量，g　；Ｖ-----提取后加三氯甲烷定量之体积，mL　；100-----以每100g 样品计。;（一）维生素C的测定 维生素C是一种己糖醛基酸，有抗坏血病的作用，所以又称作抗坏血酸。新鲜的水果蔬菜，特别是枣、辣椒、苦瓜、猕猴桃、柑橘等食品中含量尤为丰富。 方法：测定维生素C常用的方法有靛酚滴定法、苯肼比色法、荧光法和高效液相色谱法等。 以下介绍荧光法、2，4-二硝基苯肼光度法。