效阈浓度之复方四种单体与配伍细胞生物效应.docVIP

　　效阈浓度之复方四种单体与配伍细胞生物效应 第一部分综述综述 一方剂现代实验研究进展 1方剂功效与机理研究 方剂功效和机理的研究一直是方刻药理研究中的主要领域之一。基于方劍临床运用的经验和方剂的功效特点，运用实验的方法，了解全方药理作用及在此基础上探查其作用机制是方刻药理研究的主要内容。为探明利水祛湿方五荟散的利尿作用的机理，实验按水煎法制得浓度为100%的五茶散及其各单味药的煎液，观测给予NIH鼠灌胃不同煎液后不同时间点的血榮心纳素（ANF)。结果五茶散、泽湾及桂枝煎液灌胃45fflin后血柴ANF显著性升高，提示其利尿作用与ANF升高有关⑴。根据大承气汤治疗里实热证，用自身粪便法建立里实热证大鼠模型，分别灌胃给予4.59、9. 18g/kg的大承气汤，放射免疫法检测各组大鼠血和胃肠不同节段中的胃肠激素水平。结果模型组大鼠血中胃泌素（GAS)、胃动素（MTL)和十二指肠GAS，空肠神经降压素（NT)含量较正常组明显增加，血装血管活性肠肽（VIP)、NT和胃窦、结肠NT则显著减少（Plt; 0. 05或Plt; 0. 01)；大承气汤各组大鼠血黎VIP、NT和十二指肠GAS、NT,血GAS显著降低，其中大刺量组空肠、结肠胃泌素gas和小剂量组空肠NT水平均较模型组显著升高，胃窦、结肠VIP水平明显降低0. 05或0. 01)，小剂量组血奖、胃窦、结肠中MTL及胃窦NT明显降低（/分为正常对照组、阳性对照组、二仙汤组、淫羊藿组、仙茅组、巴戟天组、当归组、黄柏组和知母组9组。各组给药6D后测定大鼠血清卯泡刺激素（FSH)和雌二醇（E2)的含量、卵巢系数，免疫组化法观测其雌激素受体。结果仙茅组和黄柏组斯巢系数显著增加（PCO. 05), 二仙汤组、淫羊藿（仙灵脾）组、仙茅组、当归组和黄柏组卵泡数量明显增多，其中仙茅组和黄柏组可见黄体形成；二仙汤组、淫羊藿组、仙茅组、当归组和黄柏组雌激素受体P (ER(3)表达显著增强（Plt;0. 05)。结果表明二仙汤及其方中温肾药（仙灵脾、仙茅），滋阴药（黄柏）和调理冲任药（当归）均有不同程度上调卵泡颗粒细胞ER-p表达，促进鄉泡发育成熟和排卵的作用。 复方的效用是以成分为基础的，复方中只有被人体吸收的组分才可能发挥药效作用，其中一些组分或经过体内代谢转化后才能产生活性。考虑到复方吸收后其成分首先入血的特点，以血清分析作为研究的切入点，运用血清药理学方法和色谱及色谱-质谱联用技术分析、鉴定给药前后药液和血清的成分，结合药理效应，动态考察复方体内成分过程及其与药效的关系，通过比对以发现血中的与药效相关的主要活性成分。有人在建立生化汤及口服生化汤后小鼠血清HPLC指纹色谱分析方法的基础上，比较生化汤各单味药、给药及未给药大IL血清的HPLC指纹图谱，同时以保留时间相对偏差A t作为参考来衡量各谱峰的相关性，确定口服生化汤后小鼠血中移行成分及其生药，结果发现生化汤给药后血中出现了 9个移行成分，其中6个为生化汤中所含成分的原型，3个为新产生的代谢产物，有一含量较高的成分为生化汤中的主要物质。有将来自于经验复方的提取物给癫痫大鼠灌胃处理后，体外观察其含药金清对癒痫大鼠海马脑片CAI区诱发场电位的影响。结果表明含药血清能使癒痫大鼠海马脑片诱发场电位的幅度明显下降和场电位恢复至正常的时间明显缩短1。这些研究对含药血清活性的确认以及为进一步血清效用成分的探查提供基础。 2方剂的配伍研究 主要包括对方剂药味配伍和其化学部位配伍的研究。拆方药味配伍方面，如以发汗前后小鼠体重的差异作为发汗量的评价指标，釆用析因分析和单因素方差分析观察麻黄汤不同配伍对小a的发汗作用。结果表明单味药发汗作用中以麻黄作用最强，桂枝次之，杏仁和甘草组最弱；去除麻黄或桂枝的配伍均无发汗作用；麻黄与桂枝配伍后发汗作用明显增强，而与甘草配伍后发汗作用变缓，为该方以麻黄为君，麻黄桂枝协同增效及甘草缓和麻、桂後烈之性调和作用提供了 一定实验依据。有通过黄蔑、当归及其配伍对血小板聚集、小板中cAMP、cGMP的影响来研究补气药与补药的配伍意义。大昆分别灌胃给予不同配伍的药液，连续8D后，测定各组的血小板聚集率。结果与对照组比较，各给药组对体内血小板聚集均有不同程度的抑制，其中黄贫与当归配伍后对血小板聚集的抑制作用明显增强，说明二者具有协同配伍作用从成分化学的角度探讨方剂配伍。如釆用RP-HPLC法，比较葛根黄荟黄连汤不同配伍情况下煎液中葛根素、黄萃苷、盐酸小檗減的含量变化。结果葛根黄荟黄连汤4味合煎汤劍中，葛根素、黄萃苷和盐酸小檗碱的含量均比单煎低，同时含有黄萃与黄连组合的合煎液中，黄茶苷和盐酸小檗碱的含量均比黄连、黄萃单煎液中低；用对照品同法按比例配伍煎煮后进行实验，发现盐酸小檗碱含量降低近半，黄萃苷含量也有所降低；黄荟、黄连、炙甘草三味组方中的