十色谱分析概论.ppt

第十七章 色谱分析法概论 教学目标 掌握色谱法的定义和分类。 掌握色谱法的重要基本概念：分配系数、容量因子、保留时间、保留体积、死时间、死体积、峰宽、半峰宽、分离度、保留指数等及其相互关系。 熟悉四种色谱方法的基本原理和两相的特点。 掌握塔板理论的要点及塔板数、塔板高的计算。 掌握速率理论的要点，熟悉Van Deemter方程各项意义及影响因素。 色谱分析法（chromatography) 物理或物理化学分离分析方法，简称色谱法或层析法。 色谱法已广泛应用于各个领域，成为多组分混和物的最重要的分析方法。是生命科学、材料科学、环境科学等领域的重要分析手段，在药物分析中有及其重要的地位。各国药典都收载了许多色谱分析方法。 高灵敏度、高选择性、高效能、分析速度快及应用范围广等优点。 色谱法的分类 1.按流动相和固定相分子聚集状态分类 气相色谱： 气固色谱（GSC） （GC） 气液色谱（GLC） 液相色谱： 液固色谱（LSC） （LC） 液液色谱（LLC） 超临界流体色谱法 （SFC） 色谱法的分类 2.按操作形式分类 柱色谱法（column chromatography) 填充柱色谱法 毛细管柱色谱法 微填充柱色谱法 平面色谱法（plane chromatography) 纸色谱法 薄层色谱法 薄膜色谱法 毛细管电泳法 （capillary electrophoresis) 色谱法的分类 3.按分离机制分类 分配色谱法 (patition chromatography) 吸附色谱法 (adsorption chromatography) 离子交换色谱法 (ion exchange chromatography) 空间排阻色谱法 (steric exclusion chromatography) 色谱过程 分配系数和容量因子 1.分配系数： K=Cs / Cm 与组分、固定性和流动相的性质及温度有关。 2.容量因子: k=ms/mm= CsVs/CmVm 还与固定性、流动相的体积有关。 3.分配系数与容量因子的关系： k= K Vs/Vm 色谱过程方程 tR=t0( 1 + K Vs/Vm ) =t0( 1 + k ) 分配色谱法（patition chromatography） 分离原理： 利用被分离组分在固定相或流动相中的溶解度差别而实现分离。与萃取的区别是什么？ 分配色谱法（patition chromatography） 固定相：涂渍或化学键合在惰性载体颗粒上的一薄层液体。 流动相： GLC中常为氢气和氮气。 LLC中为与固定液不相溶的液体。根据固定性和流动相极性相对强度，分为正相分配色谱（固定相极性强于流动相极性）和反相分配色谱（固定相极性弱于流动相极性）。 分配色谱法（patition chromatography） 洗脱顺序 正相色谱：极性强的组分保留强，后流出。 反相色谱：极性弱的组分保留强，后流出。 吸附色谱法(adsorption chromatography) 分离原理 利用被分离组分对固体表面活性吸附中心吸附能力的差别而实现分离。吸附过程是样品中各组分的分子X与流动 相分子Y争夺吸附剂表面 活性中心的过程。 吸附色谱法(adsorption chromatography) 固定相：多孔性微粒状物质，具有较大的比表面积，在其表面有许多吸附中心。常用吸附剂：硅胶、氧化铝、聚酰胺、高分子多孔微球等。 流动相：洗脱能力主要由其极性决定，由溶剂强度ε0定量表示。 ε0值越大，洗脱能力越强。常采用二元以上混合溶剂。 吸附色谱法(adsorption chromatography) 洗脱顺序：极性强的组分被吸附强，后流出。一般规律是： 烷烃非极性，不被吸附； 不饱和化合物比饱和化合物的吸附能力强，双键越多越强； 基本母核相同的化合物，取代基极性越强，吸附能力越强； 分子中取代基空间排列对吸附能力也有影响。 常见化合物吸附能力顺序： 烷烃烯烃醚硝基化合物叔胺酯酮醛酰胺醇酚伯胺羧酸 离子交换色谱法（ion exchange chromatography） 分离原理：利用被分离组分离子交换能力的差别而实现分离。分为阳离子交换色谱法和阴离子交换色谱法。 离子交换色谱法（ion exchange chromatography） 固定相：离子交换树脂、硅胶键合离子交换剂。 离子交换树脂是具有网状结