早期生长反应基因2在肝癌组织的表达及其对细胞增殖能力的影响.pdfVIP

虫堡塞验处型盘查!!!!生!旦笠!!鲞筮!翅堡!也』垦坐!!垡：丛型!Q!鱼：!!!：箜：盟!：! ·1315· ·临床研究· 早期生长反应基因2在肝癌组织的 表达及其对细胞增殖能力的影响 潘康明邓量许峰峰 作者单位：510700广州，中山大学附属第一医院肝胆外科 通信作者：许峰峰，Email：xuff@mail．sysu．edu．cn DOI：10．3760／cma．j．issn．1001-9030．2016．05．043 【摘要】 目的观察早期生长反应基因2(EGR2)在肝癌组织中的表达，探讨其对肝癌细胞增 殖的影响及作用机制。方法分析肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库中50对肝癌组织和癌旁非癌组 织中EGR2的mRNA表达水平；用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测8个患者的肝癌组织 及配对癌旁非癌组织中EGR2的表达。通过构建重组质粒pQCXIP—EGR2并转染HepG2肝癌细胞， 构建稳定高表达EGR2的肝癌细胞株，并采用噻唑蓝(M1Tr)法和平板克隆形成实验观察稳定高表达 EGR2对肝癌细胞增殖能力的影响。同时采用Western blot法和FQ—PCR法检测稳定高表达EGR2 对细胞周期相关蛋白细胞周期蛋白Dl(CyclinD1)表达的影响。结果TCGA数据库分析结果表明 EGR2在肝癌组织中的表达量(89．95±16．04)明显低于癌旁非癌组织(440．59±60．60，P0．05)。 FQ—PCR结果也显示，与癌旁非癌组织比较，来自同一患者的肝癌组织中EGR2基因的mRNA表达 水平明显降低(P0．05)。M1’I实验结果表明显示稳定高表达EGR2的细胞的生长速度明显降低 (P0．05)。平板克隆形成实验结果显示，与对照细胞比较(177．00±8．18)，高表达EGR2的肝癌 细胞的克隆形成数量(86．00±5．51)显著减少，差异有统计学意义(P0．05)。Westernblot法和 D1的表达。结论EGR2在肝 FQ．PCR实验结果表明，稳定高表达EGR2可降低肝癌细胞中Cyclin 癌中表达下调，过表达EGR2可通过调控CyclinDI的表达进而抑制肝癌细胞的增殖。 【关键词】癌，肝细胞；早期生长反应基因2；增殖；细胞周期蛋白Dl 1 基金项目：广东省社会发展领域科技计划项目(201t1031300003) of 2in carcinomaanditseffecton of Expressionearlygrowthresponsehepatocellular proliferation cellsPan HepG2 Kangming，珧昭Liang，XuFengfeng First SunYat—sen DepartmentofHepatobiliarySurge叮，￡k AffiliatedHospitalof University，Cuangzhou 5107DD．China a眦hor：Xu CorrespondingFengfeng，Email：xuff@mail．sysu．edu．cn To the and functionof 2 【Abstract】0hiectiveinvestigateexpressionbiologic earlygrowthresponse of tissues datasetsof50 HCC (EGR2)inhepatocellularcarcinoma(HCC)．MethodsRNAseqV2 pairs their non