犊牛体外胚胎生产体系及卵母细胞发育能力研究进展.pdfVIP

2014年蔓50卷蕹15期 Revie￥∥Papers·综述 犊牛体外胚胎生产体系及卵母细胞发育能力 研究进展 贾振伟 (内蒙古民族大学动物科技学院，黄牛遗传繁育研究所，内蒙古通辽028043) 摘 要：一般认为犊牛卵巢卵母细胞资源丰富，在初情期前适宜时期，外源促性腺激素处理能够诱导卵泡发 育，获取大量的卵母细胞。犊牛作为卵母细胞供体应用于育种，将可以加快良种扩繁速度，大幅缩短世代间隔。 因此，本文对犊牛卵母细胞来源、体外胚胎生产体系、成熟受精后的发育能力进行了综述，并从超微结构、代 谢、细胞质成熟及分子成熟等方面分析了犊牛卵母细胞发育能力较低的本质原因，旨在为优化犊牛体外胚胎 生产体系、提高犊牛卵母细胞资源利用效率提供理论基础。 关键词：卵母细胞：体外发育能力；犊牛 中图分类号：S823．3 文献标识码：A 文章编号：0258—7033(2014)15一0095一05 目前．普遍认为犊牛卵母细胞资源丰富，以犊牛 随着牛体外胚胎生产体系的完善及超声波等活 为供体不仅可以为体外胚胎生产提供大量的卵母细 体采卵技术的应用，为充分利用犊牛卵母细胞资源 胞，亦可以加快良种扩繁速度，大幅缩短世代间隔， 提供了技术支撑。许多学者借鉴成年牛超排方案， 显著提高优良种畜的利用效率。另外，随着动物胚 采用外源激素诱导犊牛卵泡发育，同时结合活体采 胎生物技术的不断发展，尤其是转基因技术的发展， 卵技术．获取卵母细胞后进行体外成熟、受精生产胚 对牛的卵母细胞需求量与日俱增，仅靠收集屠宰场 胎【4-引。迄今为止，许多研究表明，犊牛在出生后2～5 宰杀牛卵巢中的卵母细胞，进行体外成熟培养，难以 月龄使用激素诱导后能够获取较多的卵母细胞【4_引， 保证卵母细胞质量和数量，而且由于供卵牛系谱、健 并且一些研究显示，犊牛卵母细胞体外成熟受精后 康状况记录不全、种质较差等原因将影响卵母细胞 形成的囊胚移植代孕母畜子宫中，经发育后能够获 的质量和获得胚胎的价值。犊牛卵巢卵母细胞资源 得正常的后代【5‘7】。 丰富．利用外源激素诱导将能够获得量多质优的卵 2犊牛体外胚胎生产体系 母细胞．为动物转基因等基础研究提供丰富的卵源。 2．1 卵母细胞体外成熟 目前犊牛卵母细胞体外 l犊牛卵母细胞来源及利用 成熟主要借鉴成年牛的培养体系。一般认为犊牛卵 Marden等…于1953年使用类似于成年牛超数排 母细胞在成年牛成熟体系(添加一些激素、血清及生 卵的方法成功诱导1周龄犊牛的卵泡发育，并获得了 长因子等)培养后发育能力较差。例如，Khatir等【8】研 较多的卵母细胞。随后一些学者使用外源促性腺激 究发现，在成熟培养液中添加血清或卵泡液。并不能 素诱导犊牛卵泡发育，激素诱导排卵后进行人工授 提高犊牛卵母细胞的发育能力，原因可能归咎于犊 精，但由于犊牛生殖道发育不成熟。形成的受精环境 牛卵丘颗粒细胞促性腺激素或生长因子的受体数量 不利于卵母细胞受精，导致受精率较低【2_31。另外，由 较少，没有激活与卵母成熟相关的信号通路。值得 于犊牛的生殖道狭窄，传统采卵技术在小牛上难以 注意的是，C6rdova等【9j研究发现，体外成熟液分别补 应用．降低了卵母细胞的回收率，而且采卵后对犊牛 充胰岛素一转铁蛋白一硒复合因子(insulin— 卵巢损害很大，导致成年后繁殖力下降，极大的限制 了犊牛卵母细胞资源的利用。 母细胞没有提高成熟受精后的发育能力，但Irll