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猪体细胞克隆胚胎体外发育过程中的凋亡规律.pdf
畜牧兽医学报2010,41(6):678—684
ActaVeterinariaetZootechnicaSinica
猪体细胞克隆胚胎体外发育过程中的凋亡规律
剧世强,郭慧利,王利勤,林鹏飞,卢 庆,芮
(南京农业大学动物医学院,南京210095)
摘要:本试验旨在研究比较猪体细胞克隆胚胎体外发育与凋亡变化规律,探讨其体外发育潜能与细胞凋亡间的
关系。将体外成熟培养获得的猪MⅡ期卵母细胞随机分为2组,分别进行体细胞核移植(SNCT)与体外受精
(IVF)处理,采用彗星试验(Cometassay)和Real-timeRT—PCR技术对体外发育过程中各时期胚胎的细胞凋亡事件
及抗凋亡基因Bcl-2 80.3%,P
mRNA的表达水平进行研究。结果表明,两组在卵裂率上无显著差异(77.6%vs
O.05),在囊胚发育率上,SCNT组胚胎明显低于IVF组,但无统计学差异(18.9%VS24.5%,P0.05);随着胚
胎发育,SCNT与IVF组胚胎的凋亡率均呈现不断增加的趋势,Bcl-2mRNA表达量则逐渐下降;到16一细胞以后,
SCNT组胚胎的凋亡率均显著高于IVF组,同时Bcl-2
表明,猪克隆胚胎生产效率低下可能与胚胎发育过程中的细胞凋亡有关。
关键词:猪;体细胞核移植;发育;凋亡;基因表达
中图分类号:$828:Q952.5文献标识码:A 文章编号:0366—6964(2010)06-0678-07
LawofPorcineCloned invitro
Apoptotic EmbryosduringDevelopment
JU Hui—li,WANG
Shi—qiang,GUO Li—qin,LINPeng-fei,LUQing,RUIRong。
210095,China)
(College Medicine,NanjingAgriculturalUniversity,Nanjing
ofVeterinary
Abstract:Theofthis wastodeterminethe between de—
purposeexperiment relationshipembryonic
and in nuclear in
porcine transfer(SCNT)embryosduringdevelopment
velopmentapoptosis
incidencewasevaluatedviaComet themRNA of
vitro.The assay,and gene
apoptotic expression
alsoexaminedReal—time results
in RT—PCR.The
implicatedanti-apoptosis(Bcl一2)wasusing
showedthattheSCNT hada similar rate(77.6%VS80.3%,P0.05)buta
embryos cleavage
lower rateo
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