十革兰氏阳性产芽孢杆菌.ppt

* * 第十二章 革兰氏阳性产芽孢杆菌 内容提要 第一节 芽孢杆菌属 炭疽芽孢杆菌 第二节 梭菌属 产气荚膜梭菌 肉毒梭菌 破伤风梭菌 第一节 芽孢杆菌属（Bacillus) 炭疽芽孢杆菌 炭疽芽孢杆菌—炭疽的病原体—人兽共患病 一、形态及染色特性 革兰氏阳性大杆菌，无鞭毛，不运动。形成芽孢、荚膜。 动物组织和血液:单在或呈短链，竹节状、有丰厚的荚膜 人工培养物:形成长链，形成芽胞，一般不形成荚膜 二、培养特性 需氧菌，适温37℃，营养要求不高 普通肉汤：37℃，24h培养，上层液透明，形成白色絮状沉淀 普通琼脂：大而扁平、灰白色，不透明、表面干燥、 边缘不整齐 火焰状菌落。低倍镜观察菌落边缘呈卷发状，不溶血。 明胶高层：呈倒置松树状 串珠反应：0.5单位/ml青霉素的培养基中，细胞壁合成受抑制， 菌体膨胀相互粘连形成“串珠状” 普通琼脂上的菌落 低倍镜观察菌落 串珠反应试验 三、抵抗力 繁殖体的抵抗力不强 60℃30-60min即可杀死 常用消毒剂均能将其杀死 青霉素等多种抗生素高度敏感 芽胞的抵抗力特别强 在干燥状态下可长期存活 121 ℃灭菌5-10min 芽胞对碘特别敏感 0.04％-10 min 四、抗原结构 是芽胞外膜层含有的抗原决定簇，特异性抗原 具有免疫原性和血清学诊断价值。 荚膜—半抗原，与毒力有关，无保护作用 不稳定，反应性特异—可用于血清学鉴定 细胞壁及菌体内的半抗原（多糖），与毒力无关 性质稳定（耐腐败、热）—Ascoli反应 胞外蛋白质抗原（炭疽毒素），具有免疫原性 免疫保护 荚膜抗原： 菌体抗原： 保护性抗原： 芽孢抗原： 五、致病性 本菌可引致各种家畜、野兽和人类的炭疽 易感性最强—牛、绵羊、鹿等 其次—马、驼、猪、山羊等次之 犬、猫、食肉兽等则有相当大的抵抗力 禽类一般不感染 感染途径：消化道、呼吸道、皮肤创伤或通过吸血昆虫传播 食草动物炭疽常表现为急性败血症 猪炭疽多表现为慢性的咽部局限感染 犬、猫和食肉兽则多表现为肠炭疽 感染表现 人类肠炭疽、肺炭疽或皮肤炭疽 实验动物：小鼠、豚鼠、家兔易感 荚膜多肽：荚膜抗吞噬，抑制抗体的作用，使易于扩散，引起 感染乃至败血症。动物无保护作用，可用于细菌鉴定 毒力因素： 炭疽毒素：水肿毒素(edema factor,EF) 致死毒素(lethal factor,LF) 保护性抗原（PA） 三种成分单独无生物学 活性（毒性），三种相结合时，表现毒性作用 增强微血管的通透性， 改变血液循环， 损害肾功能， 干扰糖代谢 导致动物死亡 具有免疫原性， 有保护作用 六、免疫性 患过炭疽的动物，能获得坚强的免疫力。 菌苗有第二号炭疽芽胞苗 无毒炭疽芽胞苗 抗炭疽血清 保护性抗原 炭疽毒素 刺激机体产生的抗体 抗感染作用 七、微生物学诊断 1.细菌学检查 采病料： 严禁剖检，局部采料（耳根部、肋间采取脾脏、 水肿液或渗出物、肠炭疽可采取粪便等 （1）涂片镜检： 碱性美蓝 瑞氏染色 姬姆萨染色 有荚膜竹节状大杆菌 组织病料 碱性美蓝 革兰氏染色 具有芽胞的链杆菌 培养物 （2）分离培养： 普通琼脂 血液琼脂 碳酸氢钠琼脂 观察生长特性 生物学特性检测 被检材料 强度株形成荚膜 动物机体内 含碳酸氢钠或血清培养基 （在CO2条件下培养） 炭疽杆菌与γ 噬菌体 具有高度的特异性 裂解炭疽杆菌 形成噬菌斑 被检菌 含青霉素 培养基 形成串珠 生长抑制 穿刺接种于 明胶培养基 18-20 ℃ 培养4-7d 呈倒置松树状 * 荚膜检查： * 噬菌体裂解试验： * 串珠试验： * 明胶穿刺试验： 细菌 噬菌斑 细菌噬菌体裂解试验 串珠试验 串珠 细菌 2.动物实验： 在内脏、血液中有大量带荚膜的竹节状菌体 剖检变化： 注射部位呈胶样水肿 脾脏肿大 3.血清学检查： 热沉淀反应（ Ascoli氏沉淀反应） 间接血凝试验 串珠荧光抗体检查 被检抗原 炭疽芽孢 串珠试验与 荧光抗体法结合 病料(1:5乳悬液) 或培养物 皮下接种：小鼠0.1 ml 兔0.2-0.3 ml 败血症 而死亡 第二节 梭菌属 (Clostridium) 一、属的特征 * 菌体杆状，两端钝圆或尖锐，常单在，革兰氏染色阳性 * 形成卵圆形或圆形的芽孢，常使菌体膨大，呈梭状 二、梭菌分布 * 梭菌在自然界分布广泛—土壤、污水、腐烂植物、动物肠道 * 人与动物的伤口及软组织感染灶 三、病原梭菌及梭菌病的诊断原则 * 本属有80多种，多为非病原菌，常见