TNF-α与chemerin信号通路在前脂肪细胞分化中的细胞水平作用机制研究.pdfVIP

目 录 中文摘要I ABSTRACT III 缩 写 词 V 文章综述 1 1．肥胖 2 2. 原代培养的细胞与肥胖 6 3 ．TNF-α与肥胖的关系 7 4. 肥胖与 chemerin 信号通路的关系 9 5. 论文研究的目的及意义 13 实验部分 14 第一章 小鼠模型的建立 14 1. 材料与试剂及其配制 14 2. 仪器设备 15 3. 实验方法与步骤 15 4. 实验结果 17 5. 分析与讨论 18 第二章 小鼠原代细胞的培养及成脂分化模型的建立 20 1. 相关材料与相关试剂配制 20 2. 仪器与设备 25 3. 实验方法与步骤 25 4. 实验结果 32 5. 分析与讨论 35 第三章 TNF-α浓度的选择 37 1 材料与试剂 37 I 2. 相关仪器与设备 37 3. 实验方法与步骤 37 4. 实验结果 38 5. 分析与讨论 38 第四章 TNF-α在小鼠脂肪细胞成脂分化中的作用 40 1. 相关材料 40 2. 实验方法与步骤 40 3. 实验结果 40 4. 分析与讨论 41 第五章 TNF-α 对 chemerin 信号表达的影响 43 1. 材料与试剂 43 2. 实验方法与步骤 43 3. 实验结果 46 4. 分析与讨论 48 小 结 50 参考文献 51 攻读硕士学位期间发表的学术论文 56 致 谢57 II 中文摘要 随着人们生活水平日益提高，饮食结构的改变，生活、工作压力的剧增，使 肥胖症成为摆在人类面前越来越普遍的现象以及日益严重的问题。肥胖是以脂肪 组织过多为特点，它不仅会影响人们视觉上的美观，而且还会引起各种炎症反应， 使人体免疫调节、神经体液调节等产生各种变化，诱发产生高血压、心脏病、动 脉粥样硬化等各种心脑血管方面的疾病，严重危害人的身心健康和生活幸福。肥 胖带来的危害已受到越来越多的人的关注，因此目前对肥胖的研究在不断的深 入，希望能找着合理健康的方式抑制和治疗肥胖。 脂肪组织作为人体重要的分泌器官，能够分泌产生很多对自身有重要作用的 脂肪因子，如，TNF-α、chemerin、脂联素等。本文针对在前脂肪细胞分化过程 中，TNF-α对 chemerin/CMKLR1 信号通路机制展开研究。目的在于明确，在脂 肪细胞分化过程中 TNF-α与 chemerin/CMKLR1 信号通路之间的关系。对此深入 研究希望能为治疗肥胖找到的新的方法。 1）本文主要通过提取小鼠的基因组DNA ，通过精确的引物设计、PCR反应， 建立实验所需的小鼠模型，快速可靠充足获得实验小鼠。 2 ）取小鼠腹股沟处的白色脂肪组织离体培养，获得所需基因型小鼠的原代 前脂肪细胞。通过使用不同方法诱导小鼠前脂肪细胞成脂分化，最