脑脊液常规检查标准操作手册介绍.doc

脑脊液常规检查标准操作手册 1.目的：建立脑脊液常规检查的标准化操作； 2.范围：适用于脑脊液的常规检查(物理检查、蛋白定性、细胞检查)； 3.标本采集： 3.1 标本种类：.2 标本要求： 3.3 遇高蛋白标本时可采用EDTA K2抗凝。 .标本储存：送检。 .标本运输：室温运输。 .标本拒收标准：污染，标本：显微镜 (1)观察颜色。 (2)观察透明度。 (3)观察凝块或薄膜：收集脑脊液于试管内，静置12-24小时，正常脑脊液不形成薄膜、凝块和沉淀物。 7.2 结果判断与分析： 7.2.1颜色：正常脑脊液是无色透明的液体。在病理情况下，脑脊液可呈不同颜色改变: (1)红色：常由于各种出血引起。脑脊液中出现多量的红细胞，主要由于穿刺损伤出血、蛛网膜下腔或脑室出血引起。前者在留取三管标本时，第一管为血性，以后两管颜色逐渐变淡，红细胞计数结果也依次减少，经离心后上清液呈无色透明。当蛛网膜下腔或脑室出血时，三管呈均匀红色，离心后上清液显淡红色或黄色。红细胞在某些脑脊液中5分钟后，即可出现皱缩现象，因此红细胞皱缩现象不能用以鉴别陈旧性或新鲜出血。 (2)黄色：可因出血、梗阻、郁滞、黄疸等引起。陈旧性蛛网膜下腔或脑室出血，由于红细胞缺乏蛋白质和脂类对膜稳定性的保护，很易破坏、溶解，出血4-8小时即可出现黄色。停止出血后，这种黄色仍可持续3周左右。椎管梗阻如髓外肿瘤，格林-巴利综合征，当脑脊液蛋白质量超过1.5g/L时，颜色变黄，其黄色程度与蛋白质含量呈正比。化脓性脑膜炎、重症结核性脑膜炎时，因脑脊液蛋白质含量明显增加而呈淡黄色或黄色。重症如核黄疸、新生儿溶血病时脑脊液也呈黄染。 (3)白色或灰白色：多因白细胞增加所致常见于化脓性脑膜炎。 (4)褐色或黑色：常见于脑膜黑色素瘤。 7.2.2 透明度：正常脑脊液应清晰透明。病毒性脑炎、神经梅毒等疾病的脑脊液也可呈透明外观。脑脊液中白细胞如超过300×106/L时可变为混浊；蛋白质含量增加或含有大量细菌、真菌等也可使其混浊；结核性脑膜炎常呈毛玻璃样微混；而化脓性脑膜炎常呈明显混浊。 填写报告时用“清晰透明”、“微浑”、“浑浊”等描述。 7.2.3 凝块或薄膜：正常脑脊液不形成薄膜、凝块和沉淀物。若脑脊液内蛋白质包括纤维蛋白质多于10g/L即可出现凝块或沉淀物，结核性脑膜炎的脑脊液静置12-24小时后，可见表面有纤维的网膜形成，取此膜涂片检查结核杆菌，阳性率较高。蛛网膜下隙梗阻时，由于阻塞，远端的脑脊液蛋白质含量常高达15g/L，此时脑脊液呈黄色胶冻状。 填写报告百可用“无凝块”、“有凝块”、“有薄膜”、“胶冻状”等描述。 8.蛋白定性试验(潘氏法)： 8.1实验原理 8.2试验方法：取潘氏试剂2-3ml于小试管内，用毛细滴管滴入脑脊液1-2滴，衬以黑背景，立即观察结果。 8.3结果判断： 阴性：清晰透明，不显雾状； 极弱阳性（±）：微呈白雾状，在黑色背景下才能看到； 弱阳性（+）：灰白色云雾状； 阳性（+）：白色浑浊； 强阳性（3+）：白色浓絮状沉淀； 最强阳性（4+）：白色凝块； 9.细胞检查：在显微镜下进行检查。 每μl血液内红细胞数 例示：血液内红细胞4 000 000/μl； 脑脊液内红细胞20 000/μl； 血液内白细胞10 000/μl； 脑脊液内白细胞60/μl 20 000×10 000 则：60－ =60-50=10； 即该患者脑脊液内白细胞之校正数为10。 4 000 000 9.2.3 成人脑脊液内无红细胞，白细胞极少，其参考范围： 腰池中为（0-10）×106/L；脑室内为（0-5）×106/L； 儿童为（0-15）×106/L，新生儿为（0-30）×106/L。 如白细胞达（10-50）×106/L为轻度增加，（50-100）×106/L为中度增加，200×106/L以上显著增加。 9.3 细胞分类： 9.3.1 直接分类法：白细胞计数后，将低倍镜换为高倍镜，直接在高倍镜下根据细胞核的形态分别计数单个核细胞（包括淋巴细胞及单核细胞）和多核细胞，应数100个白细胞，并以百分率表示。若白细胞少于100个，应直接写出单核、多核细胞的具体数字。 9.3.2 染色分类法：如直接分类不易区分细胞时，可将脑脊液离心沉淀，取沉淀物2滴，加正常血清1滴，推片制成均匀薄膜，置室温或37℃温箱内待干，进行瑞氏染色后用油镜分类。 如见有不能分类的细胞，应另行描述报告，如脑膜白血病或肿瘤时。 9.3.3正常脑脊液中白细胞主要为单个核细胞，多为淋巴细胞及大单核细胞，两者之比约为