冷饭来了——J2正压固相萃取仪在检测食品中三聚氰胺的应用.pdfVIP

“冷饭”来了——J2 正压固相萃取仪在检测食品中三聚氰胺的应用 三聚氰胺风波虽早已过去，但大家对于这种物质真的了解么。现在的乳品中还会有三聚氰胺这种物质么。 食品工业中常常需要检查蛋白质含量，但是直接测定蛋白质含量技术上比较复杂，成本较高，不适合 大范围推广，所以业界常常使用一种叫做“凯氏定氮法”的方法，通过食品中的氮原子的含量来间接推算 蛋白质的含量。也就是说，食品中氮原子含量越高，这蛋白质含量就越高。这样一来，名不见经传的三聚 氰胺由于其分子中含氮原子较多，就会派上大用场。 简言概括，三聚氰胺能让蛋白质成分增加。也就是说在牛奶中加入水，再加入三聚氰胺，这样就能通 过蛋白质成分的检查，让生产商赚的更多。 三聚氰胺是一种重要的氮杂环有机化工原料，水溶液显弱碱性，能溶于甲醇、乙酸等，微溶于水和乙 醇，不溶于乙醚、苯等，而且在传统C18 柱上保留很差。利用此特性，人们普遍采用离子对试剂液相色谱 法和液质联用方法进行检测。但由于食品基质复杂，使得样品的前处理甚为关键。我们采用三氯乙酸提取， MCX 固相萃取小柱净化，辅以J2 正压固相萃取仪操作，建立一套快速、准确、重现性良好的样品外理方法。 1．材料与方法 1.1 主要仪器与试剂：Agilent HP1100 高效液相色谱仪、配四元梯度泵、在线真空脱气机、自动进样器、 柱温箱、二极管阵列检测器、J2 SCIENTIFIC 正压固相萃取仪 （图一）、超声波清洗器、离心机、固相萃 地址：北京市海淀区温泉镇高里掌路中关村翠湖科技园15 号楼1 单元1 层 邮编:100095 电话： 8610传真：8610网址： 取小柱：OASIS MCX，6mL，500mg。三聚氰胺标准品，纯度99%。 图1：J2 SCIENTIFIC 正压固相萃取仪 仪器简介： J2 SCIENTIFIC 公司最新推出了一个简单有效的正压装置，具有其高效，简便的特点。它可通过该装置中 气流调节阀来控制小柱流速的大小，并可直接吹干小柱，保证每个小柱在活化洗脱过程中具有良好的重现 性。 J2 SCIENTIFIC 仪器特点： 1 增强的正压技术，可以对每个柱管提供相同的压力 2 每个通道配置固定流量组件，确保每个柱管流速的一致性，保证实验结果的平行性和重复性 3 48 孔柱的容量分别为1ml,3ml,6ml,10ml 或15ml。在不同规格的小柱间切换，只需简单的更换架板。 4 空气供应：N2 或 75psi 压缩空气；使用10µm 的过滤器； 5 双重压力调整器，允许用户对萃取和小柱干燥设置不同的压力 6 废液收集器，收集器可以在每个步骤之前自动清空 7 单一开关可以控制样品架的上升和下降，同时具有极好的密封性。 应用领域： 食品分析：农残 药残 兽残 非法添加物 有机污染物 各种毒素样品的净化； 药物分析：药物研发 临床诊断 中草药样品成分的分离； 司法鉴定：药物毒物筛选 残留物提取净化。 1.2 样品处理 1.2.1 提取 地址：北京市海淀区温泉镇高里掌路中关村翠湖科技园15 号楼1 单元1 层 邮编:100095 电话： 8610传真：8610网址： 准确称取经粉碎混匀后样品5.0g，加入50mL 1%三氯乙酸溶液及2 mL 2%乙酸铅溶液，混匀后超声提 取30min，高速离心后取上清液待净化。 1.2.2 净化 将MCX 固相萃取小柱（6mL，500mg）置于J2 正压固相萃取仪样品架上，分别加入5mL 甲醇、5mL 水活 化，再准确移取5.0mL 离心液上柱。活化及上样时，将样品架升至顶部通过调节面板旋钮来调节N2 气流大 小，控制流速不超过1mL/min。然后再用5mL 水、5mL 甲醇洗涤SPE 柱，弃去洗脱液，将小柱升至顶部调 节气阀旋钮自动加压吹干小柱，用5%氨水甲醇溶液5mL 洗脱，收集洗脱液用氮吹仪吹干，用甲醇-水 （2:8,V/V）定容至1.0mL,过0.45 μm滤膜,上机测定。 1.3 液相色谱测定：略 2．结果与讨论 2.1 样品提取与净化 三氯乙酸具有沉淀乳及其制品中蛋白质的作用,而且有助于三聚氰胺的溶解.由于三聚氰胺呈弱碱性。 (弱阳离子化合物)，采用阳离子交换柱进行净化可达到去除杂质，提高检测灵敏度、重现性和回收率的效 果。图2 为奶粉样品直接提取后进样测定所得的色谱图，存在许多杂质峰，而图3 为提取并经固相萃取小 柱净化后的色谱图，杂质峰的干扰基本去除。