第四章分子发光分析法.pptVIP

2激发光谱与荧光(磷光)光谱(发射光谱) 镜像规则的解释 3、荧光的产生与分子结构的关系 3) 影响荧光强度的因素(外因) 二、仪器结构流程 2.荧光分析法的应用 (2)生物与有机化合物的分析 脂肪族有机化合物的分子结构较为简单，本身能发荧光的很少，一般需要与某些试剂反应后才能进行荧光分析 芳香族化合物因具有共轭的不饱和体系，多数能发荧光；可直接用荧光法测定。对于具有致癌活性的多环芳烃，荧光分析法是最主要的测定方法 可测定结构复杂的大量有机物质，如：各种维生素、叶绿素、氨基酸、蛋白质、酶和辅酶以及各种药物、毒物和农药等 (1）液槽 为在低温下测磷光，液槽 （一个直径为1mm左右的石英管）需放在充有液氮的石英制的小杜瓦瓶中。 常用的溶剂: 按5：5：2比例混合 的二乙醚，异戊烷和乙 醇的混合物，称EPA混 合溶剂。当它在液氮中 冷冻后成为透明的玻璃状物 质。 测量荧光的仪器主要由五个部分组成：激发光源、样品池、双单色器系统、检测器、记录仪。 与分光光度计有两点不同 ①两个单色器 ②检测器与激发光互成直角 1、光源 激发光源一般要求有较大的发射强度；适用波长范围宽 荧光光度计中常用高压汞灯和氙弧灯 应用最广泛的一种光 源，可发射250~800nm 很强的连续光源 利用汞蒸气放电发光的 光源；常用其发射365 nm、 405 nm、 436 nm 三条谱线 以365 nm 的谱