光接枝表面改性聚丙烯膜固定蛋白质的研究.pdfVIP

维普资讯 第35卷 第4期 北 京 化 工 大 学 学 报 Vo1．35，No．4 2008钲 JOURNALOFBEUING UNIVERSITYOFCHEMICALTECHNOLOGY 2008 光接枝表面改性聚丙烯膜固定蛋 白质的研究 甘胜华 邓建元 杨万泰 (北京化工大学材料科学与工程学院，北京 100029) 摘 要：采用表面光接枝改性，以二苯甲酮为光引发剂，在聚丙烯膜表面分别接枝一层聚丙烯酸 (PAA)、聚丙烯酰 胺(PAM)和马来酸酐(MAH)，然后分别在上述接枝层表面对牛血清 白蛋 白(BSA)进行固定。采用称重法、付立叶 红外光谱仪、水接触角测试仪、紫外一可见光谱等测试手段对表面改性效果和固定的蛋白量进行表征。结果表明，在 经MAIl、AA和AM接枝改性过的聚丙烯膜表面可以固定BSA。而且固定效果率比较为：MAHAAAM。 关键词：聚丙烯膜；光接枝表面改性 ；牛血清 白蛋 白；表面固定 中图分类号：TQ028 枝改性的方法先对聚丙烯 (vP)膜表面进行改性，即 引 言 在其表面接枝不同的基团，然后分别与牛血清白蛋 蛋白质芯片可以高效地获取生物体中蛋白质信 白进行反应，达到在其表面固定牛血清 白蛋 白的 目 息。因此，蛋白质芯片技术的研究已经成为近年来 的。本研究有望为通用聚合物膜用作固定蛋白质的 的研究热点之一 【1]。制备高质量蛋 白质芯片中的 基质载体提供 了基础参考依据。 一 个关键问题就是载体 的选择L2]，被用作蛋白质芯 1 实验部份 ． 片常见的基质载体有_3J：硝酸纤维素膜、聚偏氟 乙 烯膜、硅树脂、硅 晶片、塑料片[]和玻璃片[。高分 1．1 原料与试剂 子聚合物因其具有质轻、透 明、价格低廉、易加工等 聚丙烯 (pP)膜，一般商 品级，广州包装材料厂 ； 优 良性 能，已越来越 多地被用作微 芯片的首选基 马来酸酐 (MAH)，丙烯酸 (AA)，丙酮 (CA)，丙烯酰 材 6【J。但是，由于聚合物材料表面的化学惰性 ，无 胺 (AM)，北京化学试剂公司；二苯 甲酮 (BP)，上海 法直接通过如包埋、共价键合等手段完成对生物分 试剂一厂；磷酸二氢钠 (Nali2PO4)，磷 酸氢二钠 子的有效固定。因此，用作蛋白质基材的聚合物材 (Na2HPO4)，氯化钠，北京化工厂 ；牛血清 白蛋 白 料须经过一系列的表面修饰才能满足要求。 (BSA)，北京欣经科生物技术有限公司，以上试剂均 蛋白质与固相载体 的结合方法主要有两种[： 为分析纯。去离子水，自制 。 非共价键的吸附和共价键结合。前者具有高吸附容 1．2 实验方法 量，较好地保持蛋白质的空间结构，较低的非特异 1．2．1 样品预处理及实验装置 性吸附等优点，但是物理的非共价吸附无法控制蛋 将聚丙烯膜裁剪成直径约为4era的圆片。为 白质吸附的数量以及蛋 白质吸附的方 向性；后者是 了除去膜表面的尘粒以及加工工艺过程中填料在其 利用载体表面衍生活泼的化学基 团，如醛基、环氧 内部产生的小分子，先将膜放入索式抽提器 中抽提 基、氨基及一些螯合物等l9。川，达到对蛋 白质 的固 36h，取出冲洗、干燥。光接枝改性的实验装置及具 定。 体方法参见文献[12]。 本文采用操作简单、成本低廉 、易工业化的光接 1．2．2 制备表面不同基团的PP膜