抗COX-2人源单链抗体的原核表达、纯化及活性分析.pdfVIP

内容提要 环氧合酶-2 (COX-2)是催化花生四烯酸转化为前列腺素类物质的限速酶。大 量的研究证明，COX-2 的诱导表达是肿瘤发生早期的标志事件之一，而且也是 肿瘤细胞恶性转变的一个重要促进因子。COX-2 在肿瘤发生、发展、浸润转移 等过程中都扮演重要的角色，是肿瘤治疗的一个重要靶点，如何下调过度表达和 活化的 COX-2 已经成为研究热点。鉴于当前 COX-2 的非选择性非甾体类抗炎药 和选择性抑制剂的毒副作用，特异、高效的抑制 COX-2 生物学功能的途径和策 略的研究将具有重要的意义。 单链抗体（scFv ）以其分子量小，免疫原性低等优点，在肿瘤诊断和治疗中 具有独特的优势，目前已经有多种基于单链抗体的抗肿瘤药物应用于临床试验。 本研究首先利用大肠杆菌原核表达了具有生物学活性的重组人 COX-2 蛋 白，进而以其为抗原对噬菌体抗体库筛选获得了抗 COX-2 单链抗体基因，并且 可溶性表达和纯化了抗 COX-2 单链抗体蛋白，应用 ELIS