根癌农杆菌介导的柑桔遗传转化技术-中柑所在线.pdfVIP

第 卷 第 期 ! # $ % 45 6 012 345 $1 3 6 年 月 4::; !#$%% ’()*$+, (- .*(/#!+, !*(/ 789 34::; 根癌农杆菌介导的柑桔遗传转化技术 ’ () *+, -./ 0 12 345 -67 897 !#$% ’()*+ ,- ./ .)( 0 以新会橙、锦橙（ ）胚状体以及北碚 锦橙、纽荷尔脐橙（ ）田间成年 ’ !#$% ’()( BC ? ..) !* ’()( BC ? 树腋芽为转化起始材料，经含外源抗菌肽基因（ D 和 E ）的根癌农杆菌感染后，比较了胚状体在不 ’+,- !).$/0 ( 同培养基中丛芽的诱导频率和卡那霉素（ ）质量浓度对胚状体丛芽生长以及最终转化频率的影响，也对成 F0 年树腋芽在不同 、 质量浓度处理、不同创伤部位和是否用石蜡带（ ）包裹创伤口的诱芽和转化率 ED GDD H1:1I230 进行了研究。 检测和 分析证明外源抗菌肽基因 ’+,- 和 !).$/0 ( 已导入上述 个柑桔品 HJK L7;M45:8AC37M N D EO . 种；离体抑菌试验证明转基因植株叶片提取液对溃疡病菌有一定的抑制作用。建立了一个简便、快捷、通用的 柑桔遗传转化体系。 () * 柑桔 胚状体 成年树腋芽 遗传转化 根癌农杆菌 +!,-./ L,,,?.’ 柑桔是多年生木本植物，由于育种周期长、存在珠心胚和嵌合体的干扰以及遗传上高度杂合，用常 PAAAAAAAAA 规育种方法进行抗病等定向改良育种难度较大；近年来日趋完善的遗传转化技术为柑桔类果树育种开 Q R’S 辟了一条新途径。国内外自 世纪 年代以来已有一些农杆菌介导柑桔遗传转化的报道 ； (* -* T77:5 Q.S QS 等 、陈善春等 还成功地将外源目的基因导入柑桔并获得转基因植株。但已有报道的研究中，多以实生 苗作为转化起始材料；对于目前普遍发展的无核品种，因为没有种子，这些方法的应用受到限制。胚状 体在柑桔的大部分品种中已被成功诱导，其再生系统比较完善Q,S ，是良好的转化起始材料，在山核桃等 植物中，用胚状体作为转化起始材料已成功地将外源基因导入这些植物的基因组Q)S ；此外，从柑桔的成 年树腋芽取材不仅不受品种限制，还能避开童期问题。因此，笔者以柑桔胚状体和成年树腋芽为转化起 始材料，旨在建立一种通用、简单、快捷的遗传转化体系。 ! 01 23, !’! 0 1