坛紫菜单性叶状体细胞的发育研究.pdfVIP

第38卷第，期 中国海洋大学学报 38(3)．4，，～。：3 1111生!旦 !兰呈!竺里!竺些竺!竺兰垒竺旦翌!兰墨翌三兰里!竺坚!型垒 丛!z!!!!! 坛紫菜单性叶状体细胞的发育研究’ 王 娟1， 戴继勋2” (1．菏泽学院生命科学系。山东菏泽274015；2中国海洋大学海洋生命学院，山东青岛266003) 摘要： 研究采用雌雄营养组织块和营养细胞进行培养，以了解坛紫菜单性营养细胞的生长发育情况。结果表明，坛紫 菜雌性营养细胞无论在组织水平还是在细胞水平均以产生红色果胞或果孢子细胞为主，有少量细胞发育成精子囊，并放 散精于。雄性营养组织和营养细胞以产生精子为主，但不能再分化成丝状体；产生的少量果孢子细胞能发育成丝状体。 因此，在室内培养条件下，坛紫菜单性叶状体都能产生两性细胞，它们的差异只是不同性细胞所占的优势不同，并讨论了 单性叶状体的产生。 关键词： 坛紫菜；营养组织块；营养细胞；发育 中图法分类号：Q2；Q178．53 文献标识码： A 文章编号： 1672—5174(2008)03—419．05 紫菜是目前世界上人工栽培海藻中经济价值最高 海水(10mg·L一1NaN03和1 的种类。中国的紫菜栽培种有2个，南方为坛紫菜 1．4方法 etZheng)，北方为条斑紫 (P0r加ym耽i纽，2Pns如Chang 试验前将坛紫菜叶状体在消毒海水中复苏24h， 菜(P0r加朋妒捌72s拈Ueda)。坛紫菜盛产于我国闽、然后挑选雌雄个体，单棵在显微镜下切取营养组织(2 浙两省，在两大栽培紫菜中产量最高，生产面积最多， ～3mm)分别放在培养皿中隔离培养。将去除生殖细 已成为我国南方沿海地区的支柱产业。 mm×2 胞的雌雄叶状体分别切成2 mm左右的碎片， 自从成功用酶法分离获得紫菜体细胞和原生质体 加入2％的海螺酶、1％的纤维素酶R一10和 以来，已有一些藻类学家采用液体培养法和固体培养 1．5mo卜L_1的葡萄糖，20～25℃酶解2～3h后，紫菜 法对紫菜营养细胞的生长发育进行了研究[1-6J。紫菜细胞变得松动，加入少许海水使细胞游离，用筛绢(200 是否存在单性生殖仍是一个值得研究的问题【_7|。最近 有报道坛紫菜雌性和雄性叶状体的单克隆丝状体培育 涤离心，以彻底去除残留的酶液。将收集到的雌雄叶 和单性生殖，但是纯系丝状体产生的途径并不清楚，仍 状体营养细胞分别放入培养皿中置培养箱中进行隔离 有探讨的必要[8-“]。本文利用坛紫菜雌雄异体的特培养。 性，将其雌雄叶状体的营养细胞从细胞水平和组织水 培养条件：温度为20℃和25℃，光照密度为40 平分别进行隔离培养，探索其生长发育的规律和特点。 L：12 弘mol·m-2·s～，光周期12D，雌雄组织块和雌雄 营养细胞的培养每5d更换1次培养液，每个培养皿为 1材料与方法 50 照相记录。 1．1材料 坛紫菜叶状体采自浙江省象山县紫菜养殖场，然后 2结果 经阴干密封于封口袋中，于一20℃冰箱中冻存备用。 1．2试剂 2．1雌性营养组织的发育 海螺酶，由中国海洋大学海藻遗传学实验室自制，