《第一节 动物细胞培养》课件.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 4.有性生殖的生物产生后代需进行受精作用，植物体细胞杂交要进行原生质体的融合，单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合，可见细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合的简略过程，据图回答相关问题: (1)若a、b分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于受一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于800 lx时都不能生长。要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞，较为简便的筛选方法是　　　　　　　　　　　　　　　。 (2)若a、b表示两种植物体细胞，则由d细胞形成杂种植株的原理是　　　　　　　　　　，这种育种方法的优点是________ 　　　　　　　　　　　　　　　　　。 (3)若a、b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，则d细胞的特点是 _____________________________。由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较，具有__________________________________ 的特点。生产上一般不能通过直接培养B淋巴细胞的方法生产单克隆抗体的主要原因是　　　　　　　　　　　　　　　。 (4)下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来。 【解题指南】 (1)考查实质:植物体细胞杂交与单克隆抗体的制备。 (2)解题关键: ①hr是a、b产生的配子中相同的配子，另外两种配子分别是Hr、hR。 ②两个不同的细胞形成的杂种细胞发育成植株。 ③骨髓瘤细胞的特点、B淋巴细胞的特点与融合后的细胞具备的特点之间的关系。 ④单克隆抗体产生的过程由细胞融合和杂交细胞的培养两部分组成。 【解析】(1)a的花粉基因型为Hr和hr，b的花粉基因型为hR和hr，只有HhRr的基因组合方式没有隐性纯合基因，所以杂种细胞HhRr能在光照强度大于800 lx时生长。 (2)植物体细胞杂交形成植株，是植物细胞全能性的表现，克服了自然条件下物种之间的生殖隔离。 (3)在单克隆抗体产生过程中细胞d是杂交瘤细胞，具备了融合前两种细胞的优点，能无限增殖且产生特定抗体。而且反复筛选的细胞d产生的抗体品质优良。B淋巴细胞不能无限增殖，无法得到大量的抗体。 (4)只能注射特定抗原后才能得到特定的B淋巴细胞，再与骨髓瘤细胞融合，经筛选后可体内培养也可体外培养以得到大量单克隆抗体。 答案:(1)给予大于800 lx的光照 (2)植物细胞的全能性 克服了远缘杂交不亲和的障碍 (3)既能无限增殖，又能产生特定抗体 特异性强、灵敏度高、化学性质单一 B淋巴细胞不能无限增殖 (4) 5.(能力挑战题)运用动物体细胞杂交技术可实现基因定位。研究发现:用人体细胞与小鼠体细胞进行杂交得到的杂种细胞含有双方的染色体。杂种细胞在持续分裂过程中仅保留小鼠的染色体而人的染色体则逐渐丢失，最后只剩一条或几条染色体。下图是人的缺乏HGPRT酶的突变细胞株(HGPRT-)和小鼠的缺乏TK酶的细胞株(TK-)融合后在HAT培养液中培养的过程，结果表明，最终人的染色体在融合细胞中仅存有3号染色体或17号染色体或两者都有。已知只有同时具有HGPRT酶和TK酶的融合细胞才可在HAT培养液中长期存活与繁殖。 (1)体细胞杂交克服了　　　　　　的障碍，过程①常用的生物方法是　　　　　　　　　　　　。 (2)过程②中，为了防止细菌的污染，所用培养液应该添加一定量的　　　　　，此外，还要定期用　　　　　　　处理细胞，使贴壁生长的细胞脱落，形成细胞悬液。 (3)从培养过程看，HAT培养液不仅能提供养料，还起__________ 作用。 (4)从图示结果看，可以确定人的　　　　　　基因位于______　　号染色体上。 【解析】(1)将不同种生物的体细胞进行融合，可以打破生殖隔离，克服远缘杂交不亲和的障碍。动物体细胞融合过程中可以用灭活的病毒作促融剂。 (2)在动物细胞培养过程中，可以向培养液中添加抗生素，防止细菌的污染。动物细胞培养过程中，细胞贴壁生长，需用胰蛋白酶定期处理使细胞从瓶壁上脱落下来，制成细胞悬液，继续培养。 (3)由题干“只有同时具有HGPRT酶和TK酶的融合细胞才可在HAT培养液中长期存活与繁殖”可知，HAT培养液是一种特殊的选择培养基。 (4)由图示结果可知，只要含有人的17号染色体的细胞就能够正常存活，说明人的TK酶基因位于17号染色体上。 答案:(1)远缘杂交不亲和(或生殖隔离) 用灭活的(仙台)病毒诱导融合 (2)