2-2细胞分离及胞内产物的溶解.pdf

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细 胞 破 碎 1 生物分离过程的一般流程 原料液 原料液 细胞分离( 离心,过滤) 细胞分离( 离心,过滤) 路线二 路线一 路线二 路线一 细胞-胞内产物 清液-胞外产物 细胞-胞内产物 清液-胞外产物 细胞破碎 路线一B 细胞破碎 路线一B 路线一A 路线一A 包含体 碎片分离 包含体 碎片分离 溶解(加盐酸胍、脲) 粗分离(盐析、萃取、超过滤等) 溶解( 加盐酸胍、脲) 粗分离( 盐析、萃取、超过滤等) 复性 纯化(层析、电泳) 复性 纯化(层析、电泳) 脱盐(凝胶过滤、超过滤) 脱盐( 凝胶过滤、超过滤) 本章内容 浓缩(超过滤) 浓缩(超过滤) 精制(结晶、干燥) 精制( 结晶、干燥) 2 本节的主要内容 常见的细胞壁结构 细胞破碎技术 包涵体的纯化方法 3 概述 不同类型的细胞分泌目标产物的类型:  动物细胞多分泌到细胞外培养液  植物细胞多为胞内产物  微生物(细菌/酵母/真菌)胞内、胞外 对于胞内产物需要收集菌体或细胞进行 破碎。 4 概述 大多数情况下,抗生素,胞外酶,一些多糖, 及氨基酸等目标产物存在于发酵液中。 有些目标产物存在于生物体中。 尤其是由基因工程菌产生的大多数蛋白质是 在细胞内沉积。 脂类物质和一些抗生素包含在生物体中。 5 概 述 细胞破碎(cell rupture)技术是指利用外力破 坏细胞膜和细胞壁

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