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细 胞 破 碎
1
生物分离过程的一般流程
原料液
原料液
细胞分离( 离心,过滤)
细胞分离( 离心,过滤)
路线二
路线一 路线二
路线一
细胞-胞内产物 清液-胞外产物
细胞-胞内产物 清液-胞外产物
细胞破碎
路线一B 细胞破碎
路线一B 路线一A
路线一A
包含体 碎片分离
包含体 碎片分离
溶解(加盐酸胍、脲) 粗分离(盐析、萃取、超过滤等)
溶解( 加盐酸胍、脲) 粗分离( 盐析、萃取、超过滤等)
复性 纯化(层析、电泳)
复性 纯化(层析、电泳)
脱盐(凝胶过滤、超过滤)
脱盐( 凝胶过滤、超过滤)
本章内容
浓缩(超过滤)
浓缩(超过滤)
精制(结晶、干燥)
精制( 结晶、干燥) 2
本节的主要内容
常见的细胞壁结构
细胞破碎技术
包涵体的纯化方法
3
概述
不同类型的细胞分泌目标产物的类型:
动物细胞多分泌到细胞外培养液
植物细胞多为胞内产物
微生物(细菌/酵母/真菌)胞内、胞外
对于胞内产物需要收集菌体或细胞进行
破碎。
4
概述
大多数情况下,抗生素,胞外酶,一些多糖,
及氨基酸等目标产物存在于发酵液中。
有些目标产物存在于生物体中。
尤其是由基因工程菌产生的大多数蛋白质是
在细胞内沉积。
脂类物质和一些抗生素包含在生物体中。
5
概 述
细胞破碎(cell rupture)技术是指利用外力破
坏细胞膜和细胞壁
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